Controle de podridão de colmo causado por Macrophomina phaseolina em mamona (Ricinus communis), através de bactérias do gênero Bacillus, o teste para nova formulação de uma suspensão contendo bacteriófagos e sua avaliação no controle da podridão das crucíferas em repolho (Brassica oleraceae) causada por Xanthomonas campestris pv. Campestris

Abstract

O trabalho objetivou avaliar a eficiência no controle do fungo Macrophomina phaseolina através de isolados de bactérias do gênero Bacillus, obtidas da rizosfera e do rizoplano de mamonas selvagens e de uma cultivar (Al Guarany 2002), verificando sua influência no controle da doença podridão de tronco. Os isolados foram avaliados em pareamento com o patógeno Macrophomina phaseolina, bem como seu efeito por antibiose, metabólitos voláteis, sideróforos, produção de quitinase, assim como colonização do ritizoplano. Os isolados selvagens mostraram-se mais eficientes no controle da Macrophomina phaseolina. A bactéria RZ 1, isolada de mamoneira selvagem, inibiu o desenvolvimento do fungo em 9%, através do pareamento. A rizobactéria RZ 2 conseguiu inibir o crescimento do fungo em mais de 25%, por meio de sua antibiose; bactérias isoladas da cultivar mostraram 23% e 22% de inibição com os isolados RZE 4 e RP 2, respectivamente. A produção de metabólitos voláteis mostrou-se eficiente com o isolado RP 5, inibindo, completamente, seu desenvolvimento; os microrganismos RPE 12, RPE 7 e RPE 5 destacaram-se pela redução na produção de conídios. Os isolados RPE 13 e RP 2 produziram sideróforos, diferindo, estatisticamente, dos demais. Os isolados RZ 2 e RP 3 foram os que mais produziram quitinase, principalmente quando em contato com o antagonista, indicando indução enzimática pelo patógeno. O tempo de produção não influenciou na produção do RZ 2, mas exerceu influência na produção do RP 3. Isolados eficazes em procedimentos de antagonismos colonizaram, eficientemente, a raiz da mamona, como as bactérias RP 5 RZ 2 e RPE 13, que produziram metabólitos voláteis e antibiose sideróforos respectivamente. O patógeno mostrou-se de tal forma virulento, que. poucas plantas emergiram e as que emergiram, após alguns dias, apresentaram sintomas severos, comprovando que o fungo isolado em Pelotas é altamente virulento. O isolado RP 5 mostrou-se bastante eficiente para controlar os sintomas apresentados pela planta, controlando melhor que fungicidas mundialmente conhecidos, como Triadimenol plus triflumoron e Iprodione, apresentando média do índice de cura de 2,48; 2,08 e 1,76, respectivamente. Um novo método de produção e identificação de bacteriófagos em uma suspensão, e seu potencial como controlador biológico, foi verificado nesta tese. A suspensão obtida mostrou-se eficaz para controlar tanto in vitro quanto in vivo a bactéria Xanthomonas campestris pv. campestris. Evidenciou-se uma diferença entre a suspensão criada do patógeno (PLP) e outra que não foi (PLN), pois havia halos no crescimento bacteriano em 48 h / 28ºC produzido pelas suspensões PLS e PLP, verificando-se que a suspensão PLN não apresentou halo. Apesar dos tratamentos PLP e PLS não diferirem estatisticamente em relação às UFCs, atingindo valores de 5 x 105 e 1 x 105 respectivamente, diferiram da suspensão bruta (PLN) e da testemunha. Procedeu-se, então, avaliação in vivo com as suspensões que criaram halo, quando foram incluídos os tratamentos (PLPS) e (PLPP), que consistiram de inóculo adicionado nas suspensões matrizes (PLS e PLP), para o aumento de bacteriófagos. Observou-se, então, a redução do índice de doença para a testemunha, mostrando que o tratamento com suspensão de bacteriófagos protege a planta. Os índices mais baixos de doenças foram (PLP) e (PLS), com valores de 1,46 e 1,40, respectivamente. A matéria seca com as maiores médias (5,1 em ambos os tratamentos) foi obtida pelos tratamentos (PLP) e (PLS).

This study aimed to evaluate the efficiency in controlling the Macrophomina phaseolina fungus, through isolates from the castor bean genus Bacillus bacteria, isolates from the rhizosphere and rhizoplane of wild and cultivated plants (Al Guarany 2002), verifying its influence on root colonization. The isolates were evaluated in pairing with the Macrophomina phaseolina pathogen: its antibiosis effect, volatile metabolites, siderophores, chitinase production. In general, wild isolates prove to be more efficient in the control. The bacteria RZ 1, inhibited fungal at 9%, through of their ability of antagonism in plates. The rhizobacteria RZ 2 managed to inhibit fungus in more than 25%, through its antibiosis. The metabolites compounds production was efficient with isolate RP 5, completely inhibiting its development, organisms RPE 12, RPE 7 and RPE 5 were emphasized through reduced conidia production. Isolates RPE 13 and RP 2 produced siderophores, statistically differing from the other isolates. RZ 2 and RP 3 were the antagonists that produced more chitinase, especially when in contact with the antagonist, indicating enzyme induction through the pathogen. Production time had influence on RP 3 production. Isolates, efficient in antagonism mechanisms, efficiently colonized the castor bean plant roots, as the bacterias RP 5, RZ 2 and RPE 13. The pathogen was highly virulent, this pathogen emerged and the few plants that emerged after a few days showed severe symptoms. The isolate RP 5 proved to be very effective in controlling the symptoms rather than controlling the plant known worldwide as fungicide Triadimenol plus triflumoron and Iprodione presenting average cure rate of 2.48, 2.08 and 1.76 respectively. A new method for production and identification of bacteriophage suspension and its potential as a biological control was evaluated. The suspension obtained in this way was effective to control both in vitro and in vivo the bacterium Xanthomonas campestris pv. campestris. Showed a difference between the suspension of the pathogen created (PLP) and the other was not (PLN), as had halos on bacterial growth in 48 h / 28C produced by PLS and PLP suspension, the suspension PLN showed no halo. Although PLP and PLS treatments do not differ statistically with respect to CFU, reaching values of 5x105 and 1x105 respectively, differed from the crude suspension (PLN) and the witness. We then evaluated in vivo with halo suspensions created when the treatments included (PLPS) and (PLPP), consisting of inoculum added to the slurry matrix (PLS and PLP), to increase phage. It was found, then the reduction of the disease to control, showing that treatment with phage suspension protects the plant. The lowest rates of disease were (PLP) and (PLS), with values of 1.46 and 1.40, respectively. The dry matter with the highest average (5.1 in both treatments) was obtained by the treatments (PLP) and (PLS).