Identificação de amebas de vida livre e endossimbiontes em poeira de ar condicionado de um hospital escola do interior do RS

Abstract

As Amebas de vida livre (AVL) são protozoários unicelulares, distribuídos em diferentes habitats e capazes de sobreviver em condições extremas de temperatura e pH. Os principais gêneros considerados potencialmente patogênicos (PP) são Acanthamoeba, Naegleria e Balamuthia. A nutrição das AVL dá-se por fagocitose, principalmente de bactérias, que podem se replicar dentro destes microorganismos tornando-se resistentes às amebas. O objetivo do estudo foi determinar a presença de AVL/PP e sua relação com endossimbiontes na poeira de ar condicionado do Hospital Santa Cruz do Sul (HSC), RS. Foram realizadas culturas monoxênicas, identificação morfológica (critérios de Page, 1988), avaliação da patogenicidade (testes de termo e osmotolerância) e identificação molecular (PCR e FISH). Das 234 amostras, 170 (72,6%) apresentaram crescimento amebiano, sendo identificadas como Acanthamoeba spp. Destas, 122 (71,8%) foram caracterizadas como PP. Em 40 (23,5%) destas foi identificado o gênero Pseudomonas como endossimbionte e através de FISH, 26 amostras foram confirmadas como P. aeruginosa. Dos 40 isolados de amebas com Pseudomonas, 31 (77,5%) foram consideradas PP e 19 (61,2%) foram isoladas nas UTI. Na análise sequencial 73% das AVL são Acanthamoeba castellanni, sendo 96,8% destas pertencentes ao genótipo T4 e 25,8% estão infectadas com Pseudomonas aeruginosa. A maioria dos isolados foram identificados como pertencentes ao genótipo T4. Portanto, o presente estudo identificou a presença de AVL potencialmente patogênicas que transportam bactérias no sistema de ar condicionado do HSC alertando para a o risco de infecções nosocômiais por estes micro-organismos.

Free-living amoebae (FLA) are unicellular protozoa, distributed in different habitats and able to survive in extreme conditions of temperature and pH. Acanthamoeba, Naegleria and Balamuthia are the main genera considered potentially pathogenic (PP). FLA nutrition occurs through phagocytosis, mainly of bacteria, that can replicate within these microorganisms and become resistant to amoebae. The objective of the present study was to determine the presence of FLA, their pathogenic potential and relationship with endosymbionts in the air conditioner dust from Hospital de Santa Cruz do Sul (HSC), RS. Monoxenic cultures, morphological identification (Page, 1988), pathogenic potential (thermo- and osmo-tolerance tests) and molecular identification (PCR, FISH) were performed. Of the 234 samples, 170 (72.6%) presented amoebic growth, being identified as Acanthamoeba spp. Of these, 122 (71.8%) were characterized as PP. In 40 (23.5%) of these the endosymbiont Pseudomonas was identified, and 26 were confirmed as P. aeruginosa by FISH. From the 40 amoebae with Pseudomonas spp., 31 (77.5%) were considered PP and 19 (61.2%) were isolated in the ICU. Therefore, the present study identified the presence of PP FLA transporting bacteria in the air conditioner system from HSC serving as an alert to the possibility of nosocomial infections by these microorganisms.