Síndrome de Li-Fraumeni e câncer de mama com superexpressão de HER2

Abstract

Mutações germinativas no gene TP53 estão associadas às síndromes de Li- Fraumeni e Li-Fraumeni-like (SLF/SLFL), síndromes autossômicas dominantes caracterizadas pela predisposição hereditária a vários tipos de tumores em idade jovem. Entre mulheres com SLF, o câncer de mama (CM) é o tumor mais prevalente, e estudos recentes demonstraram que superexpressão de HER2 ocorre na maioria dos casos. No Brasil, a prevalência da mutação germinativa TP53-p.R337H é excessivamente alta tanto na população em geral quanto em pacientes afetados por câncer, devido a um efeito fundador. Os estudos apresentados nesta tese tiveram por objetivo explorar a associação entre a SLF e o CM com superexpressão de HER2, no contexto de diferentes mutações germinativas em TP53, incluindo p.R337H. Nossos resultados demonstraram que o imunofenótipo do CM em portadores da mutação p.R337H não é comumente HER2-positivo, conforme observado entre portadores de outras mutações patogênicas em TP53, sugerindo que diferentes mutações germinativas neste gene podem predispor a CM através de diferentes mecanismos. Nós também investigamos a prevalência de variantes germinativas de TP53 em uma coorte de mulheres com CM com superexpressão de HER2 diagnosticado antes dos 60 anos de idade, e a frequência de mutações não funcionais foi 1,9%. Embora esta prevalência encontrada tenha sido mais baixa do que o esperado, a realização de teste genético de TP53 deve ser considerada em pacientes com CM HER2- positivo, mesmo na ausência de história familiar de câncer. Neste caso, a utilização de uma técnica para detecção de mutações que seja robusta, confiável e acessível é essencial. Portanto, nós comparamos a performance e os custos de diferentes metodologias (sequenciamento de Sanger, PCR-RFLP, PCR em tempo real pelo método TaqMan e HRM), utilizando como modelo a genotipagem de p.R337H. Sequenciamento foi o método mais custoso, seguido por TaqMan, RFLP e HRM. Todas metodologias apresentaram resultados 100% concordantes e são adequadas para a detecção de mutações em TP53, sendo a escolha dependente da aplicação e do cenário clínico.

Germline mutations in the TP53 gene are associated to Li-Fraumeni and Li- Fraumeni-like Syndromes (LFS/LFL), autosomal dominant disorders characterized by increased predisposition to multiple early-onset tumors. Among LFS women, breast cancer (BC) is the most prevalent tumor and recent reports found that HER2 overexpression occurs in the majority of the cases. In Brazil, the prevalence of the TP53-p.R337H germline mutation is exceedingly high in the general population and in cancer-affected patients, as result of a founder effect. The studies presented in this thesis aimed to explore this association between the LFS and HER2-overexpressing BC, in the context of different TP53 germline mutation, including the p.R337H. Our results showed that the BC immunophenotype of p.R337H carriers was not commonly HER2-positive, as observed among other pathogenic TP53 mutation carriers, suggesting that different germline mutations in this gene may predispose to BC through different mechanisms. We also investigated the prevalence of germline TP53 sequence variants in a cohort of women diagnosed with HER2-overexpressing BC before age 60 years, and the frequency of non-functional mutations was 1.9%. Although this prevalence was lower than expected, TP53 testing should be considered in HER2-positive BC patients even in the absence of family history of cancer. In this case, the use of a robust, reliable and affordable mutation detection technique is essential. Therefore, we compared performance and cost different methodologies (Sanger sequencing, PCR-RFLP, real-time TaqMan PCR and HRM), using the p.R337H genotyping as model. Sequencing was the most expensive method followed by TaqMan, RFLP and HRM. All methodologies showed 100% agreement results and are suitable for the detection of TP53 mutations, being the choice depending on the application and clinical scenario.