Influência da vibração sobre a qualidade das células espermáticas de doses de sêmen suíno envasadas em embalagens tipo Bag ou Tubo

Abstract

Recentemente, foi demonstrado que as vibrações oriundas do transporte de doses de sêmen suíno comprometem a qualidade espermática, dependendo da intensidade e tempo de agitação. Apesar dos trabalhos até o momento terem sido realizados com embalagem tipo tubos flexíveis, há uma grande utilização de embalagens tipo bag. Assim, o objetivo do estudo foi comparar duas embalagens de doses (tipo Bag ou Tubo) de sêmen suíno, submetidos a diferentes tempos de agitação sobre os parâmetros espermáticos. Doses de 30 diferentes machos foram produzidas com 1,5 × 109 células em 45 mL em diluente BTS, e foram submetidas a 0, 6 e 12 h de agitação a 100 RPM. As doses foram armazenadas até 168 h de armazenamento e avaliadas quanto à motilidade, pH, integridade de membrana plasmática e acrossomal, potencial mitocondrial, apoptose, espécies reativas ao oxigênio (EROs) e teste de termoresitência (TTR). As análises foram realizadas como medidas repetidas, incluindo o tipo de embalagem, tempo de agitação, tempo de armazenamento (ou de incubação para o TTR), e suas interações. Observou-se redução da motilidade espermática total e progressiva, e aumento das EROs (P < 0,01) durante o armazenamento. Com o aumento do tempo de agitação, houve redução das motilidades espermáticas, aumento de pH, redução no percentual de células não apoptóticas, e com alta atividade mitocondrial, aumento de EROs, e menor resistência ao TTR (P ≤ 0,04). As embalagens tipo Tubo apresentaram maior motilidade espermática durante o armazenamento e após o TTR, além de maior proporção de células não apoptóticas, e maior atividade mitocondrial do que Bag (P < 0,01). Houve interação entre tempo de armazenado e embalagem (P < 0,01), em que o pH das doses em Tubo foi superior ao Bag após 72 h de armazenamento, e com um aumento constante até às 168 h. Também foi observado uma interação embalagem × tempo de agitação × armazenamento para integridade de membrana plasmática (P = 0,05). Quando não agitadas ou com 6 h de agitação, as embalagens não diferiram às 72 e 120 h de armazenamento. No entanto, com 12 h de agitação e após 120 h de armazenamento, a integridade de membrana plasmática foi reduzida nas embalagens tipo Bag quando comparado aos Tubos (P < 0,01). A integridade acrossomal foi reduzida em ambas as embalagens com o aumento do tempo de agitação; no entanto a redução foi mais pronunciada nos Bags em comparação aos Tubos (P < 0,05). Em conclusão, este estudo demonstrou que grupo Tubo ofereceu uma proteção superior aos espermatozoides, principalmente sob condições de agitação prolongada.

Recent research has revealed that vibrations originating from the transportation of boar semen doses can compromise sperm quality, depending on the intensity and duration of agitation. Despite previous studies primarily focusing on flexible tube package, bag package is widely used. Therefore, the objective of this study was to compare two types of packages for semen dose (Bag or Tube) submitted to different agitation times regarding sperm parameters. Semen doses from 30 different boars were produced with 1.5 × 109 cells in 45 mL with BTS extender and submitted to agitation for 0, 6, and 12 h at 100 RPM. Semen doses were then stored for up to 168 h and evaluated for motility, pH, plasma membrane and acrosomal integrity, mitochondrial potential, apoptosis, reactive oxygen species (ROS), and thermo-resistance test (TRT). Analyses were conducted as repeated measures, including package type, agitation time, storage time (or incubation for TRT), and their interactions. A decrease in total and progressive sperm motility and an increase in ROS (P < 0.01) were observed during storage. Longer agitation time resulted in reduced sperm motility, increased pH, decreased non-apoptotic cell percentage, elevated mitochondrial activity, increased ROS, and decreased the TRT results (P ≤ 0.04). Tube package exhibited higher sperm motility during storage and after TRT, as well as a higher proportion of non-apoptotic cells and cells with high mitochondrial activity than Bag (P < 0.01). There was a significant interaction between storage time and package (P < 0.01), with Tube doses showing higher pH levels after 72 h, consistently increasing up to 168 h. Additionally, there was a three-way interaction between package, agitation time, and storage for plasma membrane integrity (P = 0.05). While there were no differences between package types at 72 and 120 hours when non-agitated or submitted to 6 h of agitation, plasma membrane integrity was significantly reduced in Bag package compared to Tubes after 12 h of agitation and 120 h of storage (P < 0.01). Acrossomal integrity decreased with increased agitation time, particularly pronounced in Bags compared to Tubes (P < 0.05). In conclusion, this study highlights the superior protection offered by Tube package, especially under prolonged agitation conditions.