Infecção por PCV3 em suínos no Brasil

Abstract

O circovírus suíno (PCV) está distribuído mundialmente, e quatro espécies já foram identificadas em suínos: PCV1, PCV2, PCV3 e PCV4, dos quais o PCV1 é considerado não patogênico, o PCV4 ainda está em fase de elucidação sobre seu papel como causador de doença clínica; e os PCV2 e PCV3 são comprovadamente patogênicos. Entretanto, apesar de pertencerem ao mesmo gênero, causam doenças diferentes. O PCV3 já foi descrito em diversos países relacionado a aumento da mortalidade de porcas, falhas reprodutivas, síndrome da dermatite e nefropatia suína, inflamação multissistêmica, miocardite, sinais respiratórios e gastrointestinais. O objetivo do presente estudo é descrever e caracterizar aspectos epidemiológicos, clínicos, patológicos da infecção por PCV3 em leitões e fetos abortados no Brasil, e descrever as características moleculares do agente. Nessa tese estão incluídos 5 manuscritos aborbando diferentes aspectos da infecção por PCV3 em suínos no Brasil, além de uma patente, resultado do desenvolvimento da técnica de imunohistoquímica para auxiliar na realização do diagnóstico de PCV3. Os dois primeiros manuscritos tiveram o objetivo de descrever os achados epidemiológicos e clínico-patológicos, bem como caracterizar molecularmente o agente etiológico envolvido, em casos de infecção por PCV3 em leitões e como causa de abortos no Brasil. O diagnóstico foi confirmado através de técnica de hibridização in situ (ISH). O terceiro manuscrito apresenta o desenvolvimento inovador da técnica de imunohistoquímica para o diagnóstico de PCV3, somado a descrição de lesões microscópicas detalhadas de casos de infecção por PCV3 e carga viral. O quarto manuscrito traz uma seleção de apenas casos confirmados de PCV3 em leitões, através da ISH, com objetivo de esclarecer o tipo de resposta inflamatória envolvida na infecção pelo agente. Esse estudo foi conduzido com a realização de técnicas de imunohistoquímica para Iba-1, CD20, CD3 e também caspase 3. Os resultados demonstraram que a resposta inflamatória que predomina na infecção por PCV3 é de histiócitos e linfócitos B. A apoptose não foi um achado marcante. Esses achados contribuem para o auxílio a elucidação da patogenia da doença. O quinto manuscrito teve o objetivo de estudar e descrever lesões musculares em leitões com doença clínica associada a PCV3. Foram selecionados dois grupos de 22 leitões cada, no grupo 1 foram selecionados leitões neonatos ou abortados, com orelhas rotadas caudalmente e fraqueza (grupo “throwback ears” TE) e no grupo controle leitões provenientes das mesmas propriedades, mas sem apresentação de nenhum sinal clínico. Ambos os grupos foram positivos para PCV3 no qPCR, no entanto, os leitões do grupo TE demonstraram lesões microscópicas; e a carga viral foi significativamente maior do que os leitões do grupo controle. As lesões musculares esqueléticas e cardíacas foram significativamente maiores no grupo TE do que no grupo controle.

The porcine circovirus (PCV) is spread worldwide, and four species have already been identified in pigs: PCV1, PCV2, PCV3 and PCV4, of which PCV1 is considered non-pathogenic; PCV4 is still in the phase of elucidation about its role as a cause of clinical illness; and PCV2 and PCV3 are proven to be pathogenic. However, despite belonging to the same genus, they cause different diseases. PCV3 has already been described in several countries related to increased mortality in sows, reproductive failures, porcine dermatitis and nephropathy syndrome, multisystemic inflammation, myocarditis, respiratory and gastrointestinal signs. The aim of the present study was to describe and characterize epidemiological, clinical and pathological aspects of PCV3 infection in piglets and aborted fetuses in Brazil, and to describe the molecular characteristics of the agent. This thesis includes 5 manuscripts about different aspects of PCV3 infection in pigs in Brazil, in addition to a patent, that is the result of the development of the immunohistochemical technique to aid in the diagnosis of PCV3. The first two manuscripts aimed to describe the epidemiological and clinical-pathological findings, as well as molecularly characterize the etiological agent involved in cases of PCV3 infection in piglets and as a cause of abortions in Brazil. The diagnosis was confirmed using the in situ hybridization (ISH) technique. The third manuscript presented the innovative development of the immunohistochemical technique for the diagnosis of PCV3, in addition to the description of detailed microscopic lesions of cases of PCV3 infection and viral load. The fourth manuscript brings a selection of only confirmed cases of PCV3 in piglets, through ISH, with the aim of clarifying the type of inflammatory response involved in the infection by the agent. This study was conducted with immunohistochemical techniques for Iba-1, CD20, CD3 and also caspase 3. The results showed that the inflammatory response that predominates in PCV3 infection is histiocytes and B lymphocytes. Apoptosis was not a finding memorable. These findings contribute to help elucidate the pathogenesis of the disease. The fifth manuscript aimed to study and describe muscle injuries in piglets with clinical disease associated with PCV3. Two groups of 22 piglets each were selected, in group 1 newborn or aborted piglets with caudally rotated ears and weakness (throwback ears group TE) and in the control group piglets from the same farms, but without any clinical signs. Both groups were positive for PCV3 in qPCR, however, piglets in the TE group showed microscopic lesions; and viral load was significantly higher than control piglets. Skeletal muscle and cardiac injuries were significantly greater in the TE group than in the control group.