Transporte de doses inseminantes : impacto da duração da emissão de vibrações sobre parâmetros de qualidade de células espermáticas de suínos

Abstract

O transporte de doses inseminantes é uma prática comumente realizada na suinocultura, principalmente devido à grande utilização da inseminação artificial no cenário mundial. Durante o transporte, são emitidas vibrações que afetam os parâmetros de qualidade espermática, porém, até o momento, pouco se sabe sobre o efeito do tempo de transporte na qualidade de doses. O estudo teve como objetivo verificar o efeito do tempo de agitação em relação aos parâmetros espermáticos, em doses diluídas utilizando dois diluente. Um ejaculado normospérmico de cada macho (n=20) foi diluído em split sample em Androstar® Plus (LONG) e Beltsville Thawing Solution (SHORT). As doses foram embaladas em tubos de 60 mL (QuickTip Flexitube®, Minitüb GmbH), com um volume total de 45 ml e 1,5 bilhão de células espermáticas por dose. As doses de sêmen foram submetidas a 0, 3, 6 e 12 horas de agitação em um shaker orbital a 70 rpm. As amostras foram armazenadas a 17 ºC por 120 h. Os parâmetros espermáticos foram avaliados para motilidade espermática e integridade da membrana plasmática com SYBR-14/PI por meio do sistema CASA. Os defeitos acrossomais sob microscopia de contraste de fase, teste de termoresistência (TTR) a 38ºC por 30 e 300 min, pH, estresse oxidativo e potencial de membrana mitocondrial também foram analisados. Os resultados mostraram que as motilidades total e progressiva foram afetadas pela interação entre o tempo de agitação e o diluente, com redução linear conforme se aumenta o tempo de agitação para o diluente LONG (P < 0,02). Para os valores de pH, as doses diluídas com SHORT demonstraram maiores valores (P < 0,01) e o tempo de agitação demonstrou um efeito quadrático positivo com os maiores valores observados em 6 h de agitação para ambos os diluentes (P < 0,01). Um aumento na porcentagem de defeitos de acrossoma foi observado com o uso do diluente SHORT (P < 0,03). O TTR, integridade de membrana plasmática e potencial de membrana mitocondrial, não foram afetados pelo tempo de agitação ou interações (P ≥ 0.05). Uma interação quadrática negativa para o estresse oxidativo foi observada com o aumento do tempo de agitação, quando utilizado SHORT (P = 0,01). Nesse estudo, a longa duração do da emissão de vibrações influencia na qualidade de doses inseminantes de suínos. Além disso, o diluente de longa duração não mitigou o efeito de uma simulação de transporte a longo prazo. O mecanismo preciso da duração de emissão de vibrações emitidas no transporte sobre os parâmetros espermáticos ainda não foi elucidado.

Transport of extended boar semen doses is a common practice performed in swine industry, mainly due to the great use of artificial insemination in the world scenario. During transport, high vibrations emissions affect sperm quality parameters; however, little is known so far about the effect of long transport time under mild vibration. Therefore, this study aimed to verify the effect of agitation time regarding sperm parameters during storage in two semen extenders. One normospermic ejaculate from each boar (n=20) was diluted in a split sample design with LONG (Androstar® Plus) and SHORT (Beltsville Thawing Solution) extenders. Extended semen doses were filled in 60 mL tubes, with a total volume of 45 mL and 1.5 billion sperm cells. Extended semen doses were submitted to 0, 3, 6 and 12 h of agitation in an orbital shaker at 70 rpm. The samples were stored at 17 °C for 120 h. Sperm parameters were evaluated for sperm motility and plasma membrane integrity with SYBR-14/PI using the CASA system. Acrosomal defects under phase contrast microscopy, thermo-resistance test (TRT) at 38ºC for 30 and 300 min, pH, oxidative stress status and mitochondrial membrane potential were also analyzed. The results showed that total and progressive motility were affected by the interaction between the agitation time and the extender, with a linear reduction as the agitation time increased for LONG extender (P < 0.02). Semen doses diluted with SHORT showed higher pH (P < 0.01) and the agitation time showed a positive quadratic effect with the highest pH observed in 6 h of agitation, for both extenders (P < 0.01). An increase in the percentage of acrosome defects was observed with the use of SHORT extender (P = 0.03). TTR, plasma membrane integrity and mitochondrial membrane potential were not affected by agitation time or interactions (P ≥ 0.05). Using SHORT extender, a negative quadratic effect was observed with increased agitation time (P = 0.01) for oxidative stress status. This study has shown that long transport duration under mild vibration influence on boar extended semen doses quality. Furthermore, the use of a long-term extender seemed to fail in mitigate the effect of long transport time. The precise mechanism of transport duration in boar sperm traits remains to be elucidated.