Atividade antidermatofítica do clioquinol combinado com ciclopirox e terbinafina em ensaios in vitro e ex vivo

Abstract

Estima-se que as infecções fúngicas superficiais afetam cerca de 20 a 25% da população mundial. As dermatofitoses são conhecidas por acometer tanto os animais quanto os seres humanos. Pelo menos 30% das infecções por patógenos dermatofíticos em seres humanos são de causa zoonótica. O aumento da incidência dos casos de infecções fúngicas, associados com a falha terapêutica tem se tornado um grande desafio. Novas alternativas terapêuticas vêm sendo adotadas para o combate da resistência e recidiva dessas infecções fúngicas, tais como a reintrodução de fármacos no mercado e a terapia combinada. Desta forma, as atuais circunstâncias justificam o estudo da atividade antidermatofítica do clioquinol quando combinado com outros antifúngicos. Interações sinérgicas foram observadas para as associações testadas de clioquinol + terbinafina (42%), clioquinol + ciclopirox (50%) e clioquinol + ciclopirox + terbinafina (75%) e nenhum caso de antagonismo foi observado. As combinações duplas e triplas obtiveram efeito fungicida dependente do tempo para o isolado T. rubrum (TRU47). A combinação clioquinol + terbinafina não apresentou toxicidade em leucócitos humanos. Todas as associações testadas apresentaram baixa toxicidade em modelos alternativos como pele de orelha de suínos (não mostrando lesões microscópicas) e embriões de galinha (sendo classificadas como não irritantes). Quando analisados os resultados da atividade antidermatofítica das combinações dos agentes antifúngicos em cascos suínos, nota-se que apenas as combinações duplas conseguiram remover 100% das unidades formadoras de colônias (UFCs) formadas nos cascos suínos. Na inibição da formação do biofilme em pelos de origem animal, a combinação mais efetiva foi do clioquinol + ciclopirox. Entretanto, no ensaio de erradicação do biofilme pré-formado as melhores combinaçõess foram a associação tripla e clioquinol + terbinafina, removendo quase que 100% das células. Em conjunto, os resultados deste estudo são altamente relevantes, pois baixas concentrações de agentes antifúngicos foram combinadas e obteve-se melhor ação e menor toxicidade. Desta forma, a utilização do clioquinol em combinação com fármacos antifúngicos é um achado sem precedentes e que, futuramente, poderá ser aplicado na clínica médica.

Superficial fungal infections are estimated to affect about 20 to 25% of the world population. Dermatophytoses are known to affect both animals and humans. At least 30% of infections by dermatophyte pathogens in humans are of zoonotic cause. The increased incidence of cases of fungal infections, associated with therapeutic failure has become a major challenge. New therapeutic alternatives have been adopted to combat the resistance and recurrence of these fungal infections, such as the reintroduction of drugs on the market and combination therapy. Thus, the current circumstances justify the study of the antidermatophytic activity of clioquinol when combined with other antifungals. Synergistic interactions were observed for the tested combinations of clioquinol + terbinafine (42%), clioquinol + cyclopyrox (50%) and clioquinol + cyclopyrox + terbinafine (75%) and no case of antagonism was observed. The double and triple combinations obtained a time-dependent fungicidal effect for the T. rubrum isolate (TRU47). The combination clioquinol + terbinafine did not show toxicity in human leukocytes. All tested associations showed low toxicity in alternative models such as pig ear skin (showing no microscopic lesions) and chicken embryos (being classified as non-irritating). When analyzing the results of the antidermatophytic activity of the combinations of antifungal agents in pig hooves, it is noted that only the double combinations were able to remove 100% of the colony forming units (CFU) formed in the pig hooves. In inhibiting the formation of biofilm in animal hair, the most effective combination was clioquinol + ciclopirox. However, in the preformed biofilm eradication test, the best combinations were the triple association and clioquinol + terbinafine, removing almost 100% of the cells. Together, the results of this study are highly relevant, since low concentrations of antifungal agents were combined and better action and less toxicity were obtained. Thus, the use of clioquinol in combination with antifungal drugs is an unprecedented finding and that, in the future, may be applied in the medical clinic.