Efeitos antinociceptivos e neuroquimicos de agonista de receptor de adenosina A3 em modelos animais de dor

Abstract

Introdução: dor crônica representa um problema de saúde pública que acomete a qualidade de vida dos indivíduos e despende alto custo socioeconômico. E, as terapias farmacológicas, atualmente disponíveis, ainda resultam no uso descontinuado devido seus efeitos colaterais ou alívio inadequado da dor. Desta forma, a busca por novas modalidades de tratamento que permitam uma melhor abordagem terapêutica dos quadros dor, com menos efeitos adversos e baixo custo torna-se de fundamental importância, sobretudo nas condições crônicas. Neste contexto, o uso de agonistas seletivos de receptor adenosinérgico A3 (A3AR) parece representar uma opção terapêutica viável para o tratamento da dor crônica de diferentes etiologias. Objetivo: contudo, o objetivo deste trabalho foi investigar o efeito antinociceptivo de tratamento agudo com agonista A3AR (IB-MECA) em modelo animal de dor crônica inflamatória ou dor crônica neuropática, por meio de respostas comportamentais nociceptivas. Adicionalmente, correlacionar este efeito com níveis centrais de neurotrofinas e citocinas. Metodologia: este estudo experimental foi desenvolvido na Unidade de Experimentação Animal do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (sob CEUA n° 2015-0530, 2018-0377), e foram utilizado ratos Wistar adultos (50-60 dias), em condições ideais de biotério. Os ratos foram randomizados por peso corporal (g) em diferentes grupos dentro de cada modelo de dor (controle, controle+veículo, controle+droga padrão, controle+IB-MECA, dor, dor+veículo, dor+ droga padrão, dor+IB-MECA). Testes nociceptivos realizados foram: placa quente, von frey e Randal Selitto. Medias bioquímicas foram: níveis centrais de citocinas (interleucinas 1β e 10) neurotrofinas (fator neurotróficos derivado do encéfalo- BDNF e fator de crescimento neuronal –NGF) por técnica de ELISA. 1° protocolo experimental: modelo de dor crônica inflamatória por meio de injeção na pata traseira de Adjuvante Completo de Freund (CFA,100μL). 2° protocolo experimental: modelo de dor crônica neuropática por meio da constrição crônica do isquiático. Dados foram analisados pelo SPSS versão 20.0 e P<0.05 foi considerado significativamente diferente. Resultados: IB-MECA reverteu o comportamento hipernociceptivo apresentado em ambos modelos de dor crônica. E não foi encontrado correlação entre este efeito e níveis centrais de citocinas (IL-1β e IL-10) e neurotrofinas (BDNF e NGF). Conclusão: administração aguda de IB-MECA é capaz de desencadear efeito antinociceptivo em modelos de dor crônica inflamatória e neuropática; não estando diretamente correlacionado com alterações nos níveis de citocinas e neurotrofinas, pelo menos, nas condições experimentais do presente trabalho, como marcadores analisados e administração aguda de IB-MECA. Adicionalmente, estudos experimentais utilizando modelos animais que permitam a investigação dos quadros de dor crônica, assim como de novas terapias farmacológicas, avaliando o seu impacto nas respostas nociceptivas, seus efeitos neuroquímicos e moleculares devem ser encorajados, principalmente, relacionados ao receptor A3AR e seus efeitos antinociceptivos, onde ainda há uma escassez no entendimentos dos mecanismos intracelulares envolvidos com seu efeito analgésico.

Introduction: chronic pain represents a public health problem that affects the quality of life of individuals and spends high socioeconomic cost. And, the currently available pharmacological therapies still result in discontinued use because of its side effects or inadequate pain relief. In this way, the search for new treatments that allow a better therapeutic approach of the pain frames, with fewer adverse effects and low cost, becomes essential, especially in chronic conditions. In this context, the use of selective A3 adenosine receptor agonists (A3AR) seems to represent a feasible therapeutical tool for treatment of chronic pain from different etiologies. Objective: the main objective was to investigate the antinociceptive effect of acute treatment with A3Ar agonist (IB-MECA) in an inflammatory and neuropathic chronic pain models, assessing nociceptive behavioural responses. In addition, to investigate a correlation between this effect and biomarkers central levels, such as neurotrophins and cytokines. Methodology: this experimental study was developed at the Animal Experimentation Unit of the Hospital de Clínicas of Porto Alegre (CEUA n° 2015-0530, 2018-0377), and adult Wistar rats (50-60 days) were used under ideal conditions of biotery. The rats were randomized by body weight (g) in different groups within each pain model (control, control + vehicle, control + standard drug, control + IB-MECA, pain, pain + vehicle, pain + IB-MECA). Nociceptive tests performed were: hot plate, von frey and Randal Selitto. Biochemical measurements were: central levels of cytokines (interleukins 1β and 10) and neurotrophins (brain-derived neurotrophic factor-BDNF and neuronal growth factor -NGF) by ELISA. 1° protocol: chronic inflammatory pain model by injection of Complete Adjuvant of Freund (CFA, 100 μL) in the hindpaw. 2° protocol: chronic neuropathic pain model by the chronic constriction of the sciatic nerve. Data were analysed by SPSS version 20.0 and P <0.05 was considered significantly different. Results: IB-MECA reverted the hypernociceptive behaviour triggered by both chronic pain models; and no correlation was found between this effect and central levels of interleukins (IL- 1β e IL-10) and neurotrophins (BDNF e NGF). Conclusion: acute administration of IB-MECA is able to trigger the antinociceptive effect in the inflammatory and the neuropathic chronic pain models; however, this effect was not directly linkedd to changes in the central levels of cytokines and neurotrophins, at least, in the our experimental conditions, for example, the biomarkers analysed and acute administration of IBMECA. In addition, experimental studies using animal models that allow the investigation of chronic pain, as well as, new pharmacological therapies, assessing nociceptive responses, and its neurochemical and molecular effects should be driven, mainly, to the A3AR receptor and its effects antinociceptive, where there is still a lack of understanding of the intracellular mechanisms involved with its analgesic effect.