Proteínas do fluido uterino equino no quinto dia pós-ovulação

Abstract

A caracterização do proteoma uterino antes da entrada do embrião no útero, é essencial para conhecer os fatores bioquímicos envolvidos nos eventos fisiológicos da prenhez. O objetivo do estudo foi comparar o perfil proteico do líquido uterino coletado no dia 5 pós-ovulação de éguas cíclicas e inseminadas. Amostras de secreção endometrial foram recuperadas durante o quinto dia pós-ovulação, ao longo de 2 ciclos. O primeiro ciclo constituiu o grupo “cíclico” (n= 10), e no seguinte ciclo, as mesmas éguas foram inseminadas e constituíram o grupo “inseminadas” (n= 10). Todas as amostras foram submetidas à eletroforese bi-dimensional (2D SDS-PAGE). Um total de 107 spots foram visualizados por 2D SDS–PAGE. Três spots com diferencia na abundancia entre as éguas inseminadas e cíclicas e com presença pelo menos em 80% em um dos grupos foram selecionados e identificados. Os spots selecionados foram excisados, digeridos por tripsina e analisados por matrix assisted laser desorption/ionization time-of-flight/time-of-flight (MALDI-TOF/TOF) espectrometria de massa (MS) para identificação proteica. Três proteínas foram identificadas, ceruloplasmina (CP) serotransferrin (ST) e albumina (ALB). As proteínas identificadas neste estudo foram relacionadas com a tolerância imunológica e com o metabolismo do ferro sugerindo que mudanças no perfil proteico durante o dia 5 após à ovulação são provavelmente um mecanismo de sinalização do potencial embrião equino para o sistema imunológico materno para o seu reconhecimento imunológico. Provavelmente, mudanças na abundancia da CP, ALB e TF representam um mecanismo de preparação endometrial para a fixação e desenvolvimento de um potencial embrião equino.

Characterization of the uterine proteome before the entry of the conceptus to the uterus is essential to know the factors involved in the physiological events of gestation. The aim of the study was to compare proteomic profile of uterine fluid collected on day 5 post ovulation of cyclic and inseminated mares. Samples of endometrial secretion were recovered over 2 cycles during the fifth day post ovulation. The first cycle constituted the Cyclic group (n = 10) and in the following cycle, the same mares were inseminated and considered as the Inseminated group (n = 10). All the samples were subjected to two-dimensional electrophoresis (2DPAGE). A total of 107 spots were visualized by 2D-PAGE. Three spots with differences in abundance between the inseminated and cyclic mares and with presence in at least 80% in one of the groups were selected and identified. The selected spots were extracted, digested by trypsin and analyzed by matrix assisted laser desorption/ionization time-of-flight/time-of-flight (MALDI-TOF/TOF) mass spectrometry (MS) for protein identification. Three proteins were identified: ceruloplasmin (CP) serotransferrin (TF) and albumin (ALB). The identified proteins in this study were related to iron metabolism and immunological tolerance suggesting that changes in their abundance during the 5 days after ovulation are probably a signaling mechanism of the potential equine conceptus to the maternal immune system for its immunological recognition. Probably changes in abundance of CP, ALB and TF represent a mechanism of endometrial preparation for the maternal recognition, attachment and development of a potential equine embryo.