Efeitos do estresse de manipulação sobre marcadores metabólicos e fisiológicos do caranguejo Ocypode quadrata (Crustacea, Ocypodidae)

Abstract

O caranguejo popularmente chamado de Maria-farinha (ou Ghost crab), Ocypode quadrata, é encontrado em praias ao longo do Oceano Atlântico ocidental, desde Rhode Island (EUA) até o Rio Grande do Sul. Essa espécie tem sido considerada como bioindicadora da saúde de praias arenosas, uma vez que as atividades humanas nas praias causam impacto negativo sobre suas populações. O presente trabalho tem por objetivo avaliar os efeitos do estresse de manipulação sobre parâmetros metabólicos e fisiológicos. Os caranguejos (47 machos e 19 fêmeas), foram coletados na praia de Quintão (RS). No laboratório, os animais foram mantidos em terrários e alimentados ad libitum em dias alternados por um período de aclimatação de 15 dias. A salinidade foi mantida em 30%o, a temperatura em 25⁰C e fotoperíodo natural. Após o período de aclimatação, os animais foram acondicionados individualmente e privados de alimentação por três horas. Após isso, os animais eram submetidos, um a um, ao protocolo de estresse de manipulação. Em seguida ao protocolo de estresse de manipulação, os animais foram submetidos a diferentes tempos de recuperação. Após o término da recuperação, foram coletadas amostras de hemolinfa e, logo após, os caranguejos foram crioanestesiados para coleta dos tecidos. O estresse de manipulação de 5 minutos não foi capaz de provocar mudanças significativas em nenhum dos tempos de recuperação (30min e 60min), em variáveis como colesterol e proteínas totais, ambos na hemolinfa, tampouco nas concentrações de glicogênio no hepatopâncreas e coração, triglicerídeos no hepatopâncreas e lactato muscular. Na hemolinfa, a concentração de triglicerídeos reduziu 30 minutos após a manipulação, a glicemia elevou-se aos 30 e 60 minutos enquanto a concentração de lactato circulante elevou-se imediatamente após a manipulação e diminuiu 60 minutos após. A concentração de glicogênio muscular dos caranguejos aumentou 30 minutos de recuperação. A expressão gênica de CHH e de HSP70 não apresentou diferença significativa após 60min de recuperação do estresse de manipulação em nenhum dos tecidos analisados. Esses resultados sugerem que há gliconeogênese intramuscular utilizando lactato como substrato. Ainda percebe-se um efeito poupador de glicose resultado da utilização desse lactato muscular somado à utilização dos triglicerídeos da hemolinfa, priorizando a glicose hemolinfática para o funcionamento do sistema nervoso central do animal. Novas investigações no que concerne ao destino do lactato formado durante trabalho muscular intenso com maiores tempos de recuperação são necessárias, bem como a expressão tanto de CHH e HSP70 nestas novas condições.

The Ghost crab Ocypode quadrata, found in sandy beaches along the western Atlantic Ocean, from Rhode Island (USA) to Rio Grande do Sul, has been considered a potential bioindicator of health of sandy beaches because human activities on the beaches cause negative impact on its populations. The present work aims to evaluate the effects of handling stress on metabolic and physiological parameters of this crab. The crabs (47 males and 19 females) were collected on Quintão (RS). In the laboratory, the animals were kept in terrariums and fed ad libitum every other day during a 15 days acclimation period. The salinity was 30%o, the temperature 25°C and natural photoperiod. After the acclimation period, the animals were individually conditioned and deprived of food for 3 hours. After that, each crab was handled and not allowed to rest for 5 minutes. Following this protocol, the animals were submitted to different recovery times. After the recovery was completed, hemolymph samples were collected and, shortly thereafter, the crabs were cryoanesthetized for tissue collection.The 5-minute handling stress was not able to induce significant changes in any of the recovery times (30min and 60min) in variables such as cholesterol and total proteins, both in hemolymph, nor in glycogen concentrations in the hepatopancreas and heart, triglycerides in the hepatopancreas and muscular lactate. In hemolymph, triglycerides reduced 30 minutes after the manipulation; the glycemia increased at 30 and 60 minutes while the lactate concentration was elevated immediately after the manipulation and decreased 60 minutes after. The muscle glycogen concentration of the crabs increased at 30 minutes. The expression of CHH and HSP70 did not show significant difference after 60min recovery in any of the tissues analyzed. These results suggest that there is intramuscular gluconeogenesis using lactate as the substrate. A glucose-sparing effect is suggested as the sum of muscular glyconeogensis and the use of hemolymph triglycerides, prioritizing hemolytic glucose for the central nervous system functioning of the animal. New investigations as to the fate of lactate formed during intense muscle work with longer recovery times are required, as well as the expression of both CHH and HSP70 under these new conditions.