Atividade antitumoral dos ácidos ursólico e betulínico em modelos celulares de leucemia linfoblástica aguda de células precursoras B

Abstract

As fusões gênicas recorrentes, incluindo ETV6::RUNX1 e rearranjos KMT2A (KMT2A-r) são uma característica marcante da leucemia linfoblástica aguda precursora de células B (LLA-B). ETV6::RUNX1, comum em crianças, está associada a um bom prognóstico, enquanto KMT2A-r, encontrado em ~10% dos adultos e ~5% das crianças, indica um pior prognóstico. O tratamento continua a ser um desafio em grupos específicos, muitas vezes com efeitos adversos significativos. O ácido ursólico (AU) e o ácido betulínico (AB), triterpenos pentacíclicos, demonstram uma atividade antitumoral promissora em tumores sólidos, porém os estudos em tumores hematológicas permanecem pouco explorados. Este estudo avaliou esta atividade em linhagens celulares de LLA-B. Os resultados demonstraram que AU e AB diminuíram a viabilidade da linhagem celular REH (positiva para ETV6::RUNX1) com IC50 de 21,1 ± 3,4 μM (UA) e 18,1 ± 1,4 μM (BA) e na linhagem celular RS4;11 (positiva para KMT2A-r), com IC50 de 39,3 ± 2,0 μM (UA) e 25,3 ± 1,1 μM (BA), com indução de apoptose em ambos os modelos. As moléculas foram mais seletivas em REH (índice de seletividade de 3,7 para UA e 5,5 para BA, enquanto para RS4;11, o IS foi de 2,0 para UA e 4,0 para BA). BA induziu alterações no ciclo celular e dano ao DNA em REH, enquanto o impacto de UA em RS4;11 se limitou à diminuição da expressão de IKZF1 e BTG1. A autofagia foi detectada apenas em REH, que apresentava maior expressão de VAMP8 (envolvido na autofagia) e onde também foi detectado dano ao DNA. Este trabalho revela uma atividade antitumoral não reportada de UA e BA em modelos de B-ALL.

A hallmark of B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia (B-ALL) is recurrent gene fusions, including ETV6::RUNX1 and KMT2A rearrangements (KMT2A-r). ETV6::RUNX1, common in children, is associated with a good prognosis, whereas KMT2A-r, found in ~10% of adults and ~5% of children, indicates an adverse prognosis. Treatment remains a challenge in specific groups, often with significant adverse effects. Ursolic acid (UA) and betulinic acid (BA), pentacyclic triterpenes, show promising antitumor activity in solid tumors, yet studies in hematological malignancies remain limited. This study assessed the activity in B-ALL cell lines. Results demonstrated that UA and BA decreased the viability of REH cell line (ETV6::RUNX1 positive) with IC50 of 21.1 ± 3.4 μM (UA) and 18.1 ± 1.4 μM (BA) and in RS4;11 cell line (KMT2A-r positive), with IC50 of 39.3 ± 2.0 μM (UA) and 25.3 ± 1.1 μM (BA), with apoptosis induction in both models. The molecules were more selective in REH (selectivity index of 3.7 for UA and 5.5 for BA, whereas for RS4;11, SI was 2.0 for UA and 4.0 for BA). BA induced cell cycle changes and DNA damage in REH, while UA's impact on RS4;11 was limited to decreased IKZF1 and BTG1 expression. Autophagy was detected only in REH, which had higher expression of VAMP8 (involved in autophagy) and where DNA damage has also been detected. This work reveals an unreported antitumor activity of UA and BA in B-ALL models.