Estudo sobre a participação da autofagia na patogênese da hepatopatia secundária à deficiência de alfa-1 antitripsina

Abstract

A deficiência de alfa-1 antitripsina (DAAT) é caracterizada por uma mutação no gene SERPINA1 que causa dobramento incorreto de proteínas, resultando em níveis séricos reduzidos e acúmulo anormal de alfa-1 antitripsina nos hepatócitos, desencadeando diversas manifestações clínicas. Sabe-se que a DAAT progride para cirrose de padrão biliar através de mecanismos pouco claros. Este estudo teve como objetivo investigar e descrever marcadores de autofagia em pacientes cirróticos secundários à deficiência de alfa-1 antitripsina. Analisamos retrospectivamente dados de 22 pacientes com explantes de fígado por DAAT (casos) ou colangite biliar primária e atresia biliar (controles), diagnosticados entre 2002 e 2022. Utilizamos imunohistoquímica para avaliar a expressão de proteínas envolvidas na autofagia precoce e tardia, além de reguladores epigenéticos da autofagia e da formação de autofagossomas. Os dados demográficos e clínicos dos pacientes foram recuperados dos prontuários médicos e associados aos marcadores de autofagia. Observamos uma combinação específica da mutação homozigótica alfa-1 ATZ (PiZZ) e arginina metiltransferase-1 associada ao coativador anormal (CARM-1) poderia estar associada à progressão da doença hepática AATD para cirrose. Houve diminuição significativa da expressão da proteína CARM-1 nos hepatócitos dos pacientes com DAAT em comparação aos hepatócitos dos controles (p=0,02). As proteínas LAMP-2A e HSC70, envolvidas na autofagia mediada por chaperonas (CMA), não mostraram diferenças estatisticamente significativas na depuração de proteínas PiZZ mal dobradas.

Alpha-1 antitrypsin deficiency (AATD) is characterized by a mutation in the SERPINA1 gene which causes protein misfolding, resulting in reduced serum levels and abnormal accumulation of alpha-1 antitrypsin within hepatocytes, triggering various clinical manifestations. AATD is known to progress to biliary-pattern cirrhosis through unclear mechanisms. This study aimed to investigate and describe autophagy markers in cirrhotic patients secondary to alpha-1 antitrypsin deficiency. We retrospectively analyzed data from 22 patients with liver explants due to AATD (cases) or primary biliary cholangitis and biliary atresia (controls), diagnosed between 2002 and 2022, and used immunohistochemistry to evaluate the expression of proteins involved in early and late autophagy, beyond epigenetic regulators of autophagy and autophagosome formation. Patient demographics and clinical information were retrieved from medical records and associated with autophagy markers. We found that a specific combination of the homozygous alpha-1 ATZ mutation (PiZZ) and abnormal coactivator-associated arginine methyltransferase-1 (CARM-1) could be associated with progression of AATD liver disease to cirrhosis. There was a significant decrease in expression of the CARM-1 protein in the hepatocytes of patients with AATD compared to the hepatocytes of controls (p=0.02). The LAMP-2A and HSC70 proteins, involved in chaperone-mediated autophagy (CMA), showed no statistically significant differences in clearance of misfolded PiZZ proteins.