Avaliação das células natural killer em pacientes com linfomas não Hodgkin recidivados e ou refratários

Abstract

Linfomas Não Hodgkin (LNH) são doenças malignas que surgem de células do sistema imunológico e manifestam-se predominantemente como linfadenopatia ou tumores sólidos rela-cionados a conglomerados linfonodais. Os tratamentos para os LNH incluem poliquimioterapia com ou sem imunoterapia medicamentosa e transplante de células tronco hematopoiéticas (TCTH) em alguns casos. Novas abordagens de tratamento também são necessárias para pacientes com recidiva após a terapia de primeira linha e ou para pacientes que não são considerados candidatos elegíveis para quimioterapia de alta dose e TCTH e é com este objetivo que a terapia celular vem ganhando espaço no tratamento destes tipos de doenças. Em relação a terapia celular NK, observou-se uma potente capacidade de tais células matar linhagens celulares tumorais in vitro sem sensibilização prévia. A restauração ou potencialização dessa atividade antitumoral natural das células NK tornou-se uma abordagem terapêutica relevante progressivamente estudada no tratamento contra diversos tipos de câncer, mais frequentemente leucemia mielóide aguda com resultados promissores. Ainda há poucos dados sobre sua atividade no linfoma, a eficácia encorajadora observada para essas terapias celulares, como CAR T cell em pacientes fortemente pré-tratados levanta a questão relacionada a terapia NK nestes pacientes a partir de células Natural Killer (NK) de doadores que podem ser expandidas “in vitro “ sem um custo tão elevado como a terapia do Car T cell no momento. Para avaliarmos este perfil de pacientes realizamos um estudo pré-clínico utilizando para este fim amostras de sangue periférico de pacientes previamente tratados com 2 ou mais linhas de tratamento para LNH. Objetivo: Avaliar a viabilidade de expansão de células NK em grau clínico nos pacientes com LNH recidivado e ou refratários a terapias prévias e sua atividade anti-tumoral. Métodos: Neste contexto, avaliamos em seis pacientes com LNH recidivado ou refratários a terapias prévias em acompanhamento e tratamento no Serviço de Hematologia do Hospital de Clínicas de Porto Alegre -RS, o crescimento (número, tempo através de fold expansion e doubling time) e a efetividade das células NK (capacidade de lise da célula feeder/célula alvo) em comparação com indivíduos saudáveis, utilizando nossa plataforma tecnológica de expansão baseada na expansão celular na presença de células apresentadoras de antígeno (feeders) mbIL21K562, já aprovada e utilizada no tratamento da leucemia mielóide aguda neste Serviço. Resultados: Nesta amostra de pacientes estudada, ou seja, de pacientes portadores de LNH recidivados e ou refratários politratados, conseguimos demonstrar a viabilidade de cultivo e expansão das células NK em nível clínico e sem diferença estatisticamente significativa em relação a amostra de doadores saudáveis nas mesmas condições de cultura e expansão. Conclusão: Desta forma leva-nos a concluir que nesta amostra de pacientes, mesmo obtendo um número de células suficientes para várias infusões, estas são deficitárias quanto à sua capacidade citotóxica e da necessidade de buscarmos fontes alogênicas de doadores para este perfil de paciente.

Non-Hodgkin Lymphomas (NHL) are malignant diseases that arise from cells of the immune system and manifest predominantly as lymphadenopathy or solid tumors related to lymph node conglomerates. Treatments for NHL include polychemotherapy with or without drug immunotherapy and hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) in some cases. New treatment approaches are also needed for patients who relapse after first-line therapy and/or for patients who are not considered eligible candidates for high-dose chemotherapy and HSCT, and it is with this objective that cell therapy is gaining ground. in the treatment of these types of diseases. Regarding NK cell therapy, a potent ability of such cells to kill tumor cells “in vitro” without prior sensitization was observed. The restoration or enhancement of this natural antitumor activity of NK cells has become a relevant therapeutic approach progressively studied in the treatment against different types of cancer and more frequently acute myeloid leukemia with promising results. activity in lymphoma, the encouraging efficacy observed for these cell therapies, such as CAR T cell in heavily pre-treated patients raises the question related to NK therapy in these patients, using NK (Natural Killer) cells from donors who can be expanded “in vitro” without as high a cost as Car T cell therapy at the moment. To evaluate this patient profile, we carried out a pre-clinical study using peripheral blood samples from patients previously treated with 2 or more lines of treatment for NHL. Objective: To evaluate the feasibility of expanding Natural Killer cells at a clinical level in patients with relapsed NHL and/or refractory to previous therapies and its anti-tumor activity. Methods: In this context, we evaluated the growth (number, time through fold expansion and doubling time) and the effectiveness of natural killer cells (feeder cell/target cell lysis capacity) in six patients with relapsed NHL or refractory to previous therapies in follow-up and treatment at the Hematology Service of the Hospital de Clínicas de Porto Alegre -RS, Brazil. using our technological expansion platform based on cell expansion in the presence of mbIL21K562 antigen-presenting cells (feeders), already approved and used in the treatment of acute myeloid leukemia in this Hematology Service. Results: In this sample of patients studied, relapsed and/or polytreated refractory NHL patients, we were able to demonstrate the feasibility of culture and expansion of NK cells at the clinical level and without statistically significant difference in relation to the sample of healthy donors under the same culture and expansion conditions. Conclusion: Thus, it leads us to conclude that in this sample of patients, even obtaining a sufficient number of cells for several infusions, they are deficient in terms of their cytotoxic capacity and the need to seek allogeneic sources from donors for this patient profile.