Detecção de heterozigotos para mucopolissacaridose do tipo I Hurler, Scheie e Hurler/Scheie através das características bioquímicas da enzima alfa-L-iduronidase
dc.contributor.advisor | Coelho, Janice Carneiro | pt_BR |
dc.contributor.author | Mandelli, Jovana | pt_BR |
dc.date.accessioned | 2024-06-13T06:46:20Z | pt_BR |
dc.date.issued | 2001 | pt_BR |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10183/275815 | pt_BR |
dc.description.abstract | A Mucopolissacaridose tipo 1 (MPS 1) é uma doença causada pela deficiência da enzima α-L-iduronidase (IDUA). Como, para este distúrbio, ainda não há tratamento eficaz, a detecção de heterozigotos torna-se muito importante para o aconselhamento genético e o diagnóstico pré-natal. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a IDUA de plasma e leucócitos de heterozigotos para MPS I, tentando diferenciá-la daquela de indivíduos normais. Para isto, determinou-se a atividade enzimática, pH ótimo, Km, velocidade máxima (Vmax) e termoestabilidade da enzima a 50°C em amostras de plasma e leucócitos. Além destes parâmetros, utilizou-se também, em plasma, a cotangente do ângulo (Cα) e verificou-se a resposta da IDUA de plasma perante compostos como cloreto de sódio, cloreto de cobre e EDTA adicionados ao meio de incubação. Os heterozigotos para MPS I foram separados em dois grupos de acordo com a atividade da IDUA de leucócitos. Um grupo (grupo 1) possuía atividade enzimática inferior àquela dos controles e outro (grupo 2), atividade enzimática semelhante. Em leucócitos, a IDUA de heterozigotos apresentou três pH ótimos e aquela de indivíduos normais, somente um. O Km da enzima de indivíduos normais foi semelhante àquele do grupo 1 de heterozigotos e maior que o do grupo 2. Com base nos parâmetros bioquímicos da IDUA de leucócitos, os indivíduos normais foram distinguidos, de todos os heterozigotos para MPS I avaliados, em relação à Vmax e à termoestabilidade da IDUA a 50°C. Em plasma, a IDUA de indivíduos normais, possui atividade semelhante àquela de heterozigotos para MPS I e atua em uma mesma faixa de pH ótimo. Ocorreu diferença significativa entre o Km da IDUA de plasma dos controles e aquele da enzima de heterozigotos. Esta enzima apresentou a mesma Vmax nos dois grupos de indivíduos e uma Cα significativamente diferente, o que permitiu a separação entre eles. Assim como em leucócitos, a estabilidade da enzima a 50°C também foi diferente nos dois grupos analisados, permitindo a separação dos mesmos. Também detectou-se diferenças significativas capazes de diferenciar indivíduos heterozigotos para MPS I de indivíduos normais pela simples adição de cloreto de sódio, EDTA ou cloreto de cobre ao meio de incubação. Estes três compostos mostraram ser inibidores da IDUA de plasma. Levando-se em consideração todos os parâmetros analisados, pode-se concluir que a enzima de heterozigotos para MPS I comporta-se de maneira diferente daquela de indivíduos normais, sendo a incubação da IDUA a 50°C por 15 minutos (leucócitos) ou 12 ou 24 horas (plasma), antes da adição do substrato da reação, um simples e eficiente teste para a detecção de heterozigotos para a MPS I. Este método pode ser utilizado para a triagem de famílias de alto risco, mesmo em laboratórios não especializados. | pt_BR |
dc.format.mimetype | application/pdf | pt_BR |
dc.language.iso | por | pt_BR |
dc.rights | Open Access | en |
dc.subject | Mucopolissacaridose I | pt_BR |
dc.subject | Iduronidase | pt_BR |
dc.subject | Diagnóstico | pt_BR |
dc.subject | Triagem de portadores genéticos | pt_BR |
dc.title | Detecção de heterozigotos para mucopolissacaridose do tipo I Hurler, Scheie e Hurler/Scheie através das características bioquímicas da enzima alfa-L-iduronidase | pt_BR |
dc.type | Tese | pt_BR |
dc.identifier.nrb | 000307208 | pt_BR |
dc.degree.grantor | Universidade Federal do Rio Grande do Sul | pt_BR |
dc.degree.department | Instituto de Ciências Básicas da Saúde | pt_BR |
dc.degree.program | Curso de Pós-Graduação em Ciências Biológicas : Bioquímica | pt_BR |
dc.degree.local | Porto Alegre, BR-RS | pt_BR |
dc.degree.date | 2001 | pt_BR |
dc.degree.level | doutorado | pt_BR |
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