Parâmetros bioquímicos e citológicos associados com a identificação bacteriana em efusões sépticas em cães e gatos

Abstract

O diagnóstico sensível e específico de efusões sépticas vem se tornando cada vez mais necessário na medicina veterinária, visto que a taxa de letalidade dos animais que apresentam piotórax ou peritonite é alta. A célula encontrada em maior quantidade nos exsudatos é o neutrófilo e alterações de degeneração celular podem estar relacionadas com a presença de bactérias. A mensuração de parâmetros bioquímicos como glicose e lactato aliados à confirmação da presença de bactérias por métodos mais simples, rápidos e sensíveis podem facilitar a identificação das efusões sépticas. Esse estudo buscou associar a morfologia dos neutrófilos com os demais parâmetros citológicos, bioquímicos, cultura bacteriológica e identificação pela metodologia do Maldi-Tof em líquidos cavitários de cães e gatos. Para tanto, foram utilizadas 51 amostras de efusões de pacientes que não estavam utilizando antibioticoterapia prévia. Dentre as 51 amostras, 25 foram efusões obtidas de cães, sendo 19 assépticas e 6 sépticas e 26 amostras de efusões obtidas de gatos, 17 efusões assépticas e 9 sépticas. A avaliação citológica dos líquidos cavitários abordou a contagem total de células nucleadas, quantificação de neutrófilos, porcentagem de neutrófilos íntegros, degenerados, hipersegmentados e avaliação de sua morfologia celular. A densidade, pH, mensuração de glicose, lactato e proteína total, também foram analisadas nas efusões. A identificação da espécie bacteriana foi realizada pela metodologia do Maldi - Tof. Adicionalmente, foi realizado hemograma dos pacientes incluídos no projeto. Proteína total foi quantificada no soro e glicose e lactato no plasma fluoretado. Nas efusões sépticas foi possível observar a presença de neutrófilos degenerados (P < 0,001), alterações de degeneração como picnose e cariólise em maior proporção, confirmando que a presença de neutrófilos degenerados tem correlação com a presença de bactérias nas efusões sépticas. Além de valores de glicose baixo e lactato elevado, foi possível a identificação bacteriana pelo método Maldi - Tof na maioria das amostras e Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli e Enterobacter, foram as bactérias mais observadas nas efusões sépticas. Nos hemogramas dos pacientes com efusões sépticas foi possível observar presença de neutrófilos tóxicos (cães: P = 0,025; gatos: P: = 0,001). A avaliação da morfologia dos neutrófilos e visualização alterações de degeneração celular nas análises citológicas dos líquidos cavitários, aliados a parâmetros bioquímicos como glicose e lactato e a utilização do Maldi - Tof, são ferramentas que podem facilitar a identificação de efusões sépticas em cães e gatos contribuindo para o diagnóstico, tratamento e sobrevida desses animais.

Sensitive and specific diagnosis of septic effusions is becoming increasingly necessary in veterinary medicine, since the lethality rate of animals that present pyothorax or peritonitis is high. The cell found in greatest quantity in exudates is the neutrophil and cellular degeneration changes may be related to the presence of bacteria. The measurement of biochemical parameters such as glucose and lactate combined with confirmation of the presence of bacteria by simpler, faster and more sensitive methods can facilitate the identification of septic effusions. This study sought to associate the morphology of neutrophils with other cytological, biochemical parameters, bacteriological culture and identification using the Maldi-Tof methodology in cavity fluids from dogs and cats. 51 effusion samples from patients who were not using previous antibiotic therapy were analyzed. Among the 51 samples, 25 were effusions obtained from dogs, 19 of which were aseptic and 6 septic and 26 effusion samples obtained from cats, 17 aseptic effusions and 9 septic. The cytological evaluation of cavity fluids addressed the total cell count nucleated cells, quantification of neutrophils, percentage of intact, degenerated and hypersegmented neutrophils and evaluation of their cellular morphology. The density, pH, measurement of glucose, lactate and total protein were also analyzed in the effusions. The identification of the bacterial species was carried out using the Maldi - Tof methodology. Additionally, a complete blood count was performed on patients included in the project. Total protein was quantified in serum and glucose and lactate in fluoridated plasma. In septic effusions it was possible to observe the presence of degenerated neutrophils (P < 0.001), and degenerative changes such as pyknosis and karyolysis in a greater proportion, confirming that the presence of degenerated neutrophils has correlation with the presence of bacteria in septic effusions. In addition to low glucose values and high lactate, bacterial identification using the Maldi - Tof method was possible in most of the samples and Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli and Enterobacter were the bacteria mostly observed in septic effusions. In blood counts of patients with septic effusions it was possible to observe the presence of toxic neutrophils (dogs: P = 0.025; cats: P: = 0.001). A evaluation of neutrophil morphology and visualization of changes in cellular degeneration in cytological analyzes of cavity fluids, combined with biochemical parameters such as glucose and lactate and the use of Maldi - Tof, are tools that can facilitate the identification of septic effusions in dogs and cats contributing to diagnosis, treatment and survival of these animals.