Avaliação de microRNAS urinários diferencialmente expressos no câncer de próstata

Abstract

Introdução: O câncer de próstata (CaP) é a segunda neoplasia mais frequente em homens no mundo, a taxa de mortalidade é alta devido primariamente ao fato de a doença tornar-se clinicamente aparente após o surgimento de metástases. A busca de biomarcadores urinários para o CaP, especialmente microRNAs, tem sido estudados nos últimos anos podendo tornar-se um marcador específico para o CaP e evitar procedimentos desnecessários. Objetivo: Avaliar a expressão diferencial de miRNA urinários em pacientes com biópsias positivas e negativas utilizando o sobrenadante urinário. Métodos: O estudo foi do tipo transversal, desenvolvido em 36 meses, avaliando amostras de pacientes com indicação de biópsia de próstata. Foi realizado a extração de RNA total do sobrenadante urinário e a Reação em Cadeia da Polimerase com Transcrição Reversa, sendo analisados os miRNAs mir-200b-3p, mir-21-5p e mir-375. O nível de expressão gênica foi calculado com o método do 2-ΔΔCT. Resultados: 22 pacientes com câncer de próstata e 28 controles foram analisados, os pacientes com CaP apresentaram superexpressão de cerca de 2,5x de miR-200-3p em comparação ao grupo controle, com medianas de fold change de 4,05 e 1,52 (P=0,004); respectivamente. A expressão relativa de miR-375 foi maior nos pacientes com CaP em comparação ao controle, com medianas de fold change respectivamente de 2,75x e 1,46x (P = 0,0004). A expressão relativa de miR-21-5p apresentou diferença estatisticamente significativa entre os grupos identificando uma maior expressão nos pacientes com CaP em comparação ao controle, com mediana aproximadamente 4x maior (P = 0,001). Não foi encontrada correlação entre a expressão dos miRNAs estudados e os níveis de PSA dos pacientes, o que reforça a baixa especificidade do PSA como marcador específico para diagnóstico da CaP. Conclusão: Os mir-200b-3p, miR-21-5p e miR-375 urinário podem ser sugeridos como biomarcadores urinários para auxiliar a realização do diagnóstico tumoral de modo não invasivo, podendo contribuir para a redução no número de biópsias desnecessárias e suas repercussões clínicas desfavoráveis. O fluido urinário possui grande variabilidade na expressão de microRNAs, sendo necessário o desenvolvimento de estudos com maior número de participantes, para uma padronização com potencial uso do sobrenadante urinário como fonte de análise para os miRNAs sugeridos como biomarcadores.

Introduction: Prostate cancer (PCa) is the second most frequent neoplasm in men in the world, the mortality rate is high due primarily to the fact that the disease becomes clinically apparent after the appearance of metastases. The search for urinary biomarkers for PCa, especially microRNAS, has been studied in recent years and may become a specific marker for PCa and avoid unnecessary procedures. Objective: To evaluate the differential expression of urinary miRNA in patients with positive and negative biopsies using urinary supernatant. Methodology: The study was cross-sectional, developed over 36 months, evaluating samples from patients with an indication for prostate biopsy. Total RNA was extracted from the urinary supernatant and Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction. MiRNAs mir-200b-3p, miR-21-5p and miR-375 were analyzed. The level of gene expression was calculated using the method 2-ΔΔCT. Results: 22 patients with prostate cancer and 28 controls were analyzed. Patients with PCa showed about 2,5x overexpression of miR-200-3p compared to the control group, with median fold change of 4,05 and 1,52 respectively. The relative expression of miR-375 was higher in patients with PCa compared to controls, with median fold changes of 2,75x and 1,46x respectively (P = 0,004). The relative expression of miR-21-5p showed a statistically significant difference between the groups, identifying a higher expression in patients with PCa compared to the control, with a median approximately 4x higher (P = 0.001). No correlation was found between the expression of the studied miRNAs and the PSA levels of the patients, which reinforces the low specificity of PSA as a specific marker for PCa diagnosis. Conclusion: Urinary mir-200b-3p, miR-21-5p and miR-375 can be suggested as urinary biomarkers to assist in performing tumor diagnosis in a non-invasive way, which may contribute to a reduction in the number of unnecessary biopsies and their unfavorable clinical repercussions. The urinary fluid presents great variability in the expression of microRNAs, being necessary the development of studies with larger number of participants, for a standardization with potential use of the urinary supernatant as a source of analysis for the miRNAs suggested as biomarkers.