Resposta imune local de bovino infestado com Rhipicephalus microplus

Abstract

Introdução: Carrapatos são ectoparasitas hematófagos que transmitem agentes patogênicos aos animais e aos humanos, fato que destaca sua importância na saúde animal e na saúde pública. As infestações pelos carrapatos e as doenças causadas pelos agentes veiculados por estes causam grandes perdas na economia agrária. O método de controle mais eficaz e amplamente difundido é o uso de acaricidas, porém o uso destes provoca a seleção de populações resistentes aos acaricidas. Dentre os vários métodos alternativos para combater os carrapatos, o método imunológico é o mais promissor, por isso urge a necessidade de se entender os mecanismos celulares e moleculares envolvidos na resistência imunológica dos bovinos contra o carrapato para se desenvolver vacinas mais eficazes no seu controle. Objetivo: Caracterizar in vivo a resposta imune local de bovino infestado com R. microplus e aferir quais são as subpopulações de células do sistema imune da pele dos bovinos da raça Hereford que estão envolvidas na resposta imune contra o carrapato R. microplus. Métodos: Para avaliação do infiltrado celular no local da picada do carrapato, foram coletadas biópsias da pele do bovino com carrapato fixado e em um estádio adulto de 17 e 21 dias parasitando bovinos da raça Hereford. As amostras foram fixadas em paraformaldeido 10% e embebidos em álcool e parafina e posteriormente corados com hematoxilina e eosina. Para marcação de linfócitos T e B na pele do bovino foram usados os anticorpos anti-CD3+ e anti-CD79+. Resultados e discussão: Bovino infestado com carrapato adulto R. microplus mostrou no local da picada do carrapato e nas áreas adjacentes um perfil de células inflamatórias compostas majoritariamente por um número acentuado de eosinófilos, moderada quantidade de linfócitos e raros mastócitos. Quanto as amostras submetidas a imuno-histoquímica, anticorpos monoclonais marcaram fortemente linfócitos T CD3+, enquanto que a marcação de linfócitos B CD79+ foi fraca na pele de bovino com carrapato adulto de 17 e 21 dias. Conclusão: A resposta imune local do bovino contra o carrapato é manifestada pela resposta imune inata que é composta por granulócitos e células mononucleares. É verificado, portanto, um aumento de infiltrado celular composto majoritariamente por eosinófilos, seguidos por aumento de linfócitos e plasmócitos. Contudo, as técnicas utilizadas no presente trabalho não foram adequadas para determinação de outros tipos celulares, como basófilos, subpopulações de células dendríticas e linfócitos se estão ou não envolvidos na resposta imune na pele de bovino contra o carrapato Rhipicephalus microplus e, portanto o presente trabalho deve ser expandido considerando-se outras metodologias. Também deve ser considerado o tempo inicial de aquisição de resistência pelos bovinos e considerar diferentes estádios de desenvolvimento do carrapato, além de se estudar a interação do carrapato com vários componentes da estrutura da pele.

Introduction: Ticks are hematophagous ectoparasites which transmit pathogenic agents to animals and humans. Ticks are important parasites in the animal health and public health as well. Tick infestation and tick-borne diseases causes economic losses in the livestock industry. Amongst the methods used to tick control, the chemical method is the most widely used, but it selects populations resistant to acaricides. Alternative methods have been developed to tick control and the immunological is the more promising because it is environmentally friendly and effective. There is a necessity to understand the cellular and molecular basis underlining the interaction between tick and their hosts to better develop methods for tick control, such as vaccines. Objective: To characterize in vivo the local immune response of bovine infested with R. microplus and to investigate which subsets of cells of the immune system in the skin of the cattle are evolving in the immune response against tick. Methods: to evaluate the cellular infiltrate at the tick attachment site, skin biopsies were collected from the cattle with tick attached and considering different stages of tick development and attached for 17 and 21 days of the parasitic cycle. Samples were fix in paraformaldehyde 10%, imbibed in alcohol and paraffin and then stained with hematoxylin and eosin. To mark lymphocyte T and B in the skin biopsies, were used anti-CD3+ and anti-CD79+. Results and discussion: cattle infested with tick R. microplus showed at the tick attachment site and at the areas around a profile of inflammatory cells composed mostly by accentuated number of eosinophils, mild percentage number of lymphocytes and rare mast cells. Samples treated for immunohistochemistry, monoclonal antibodies CD3+ marked strongly lymphocyte T CD3+, while lymphocyte B CD79+ the marker was weak in all the skin biopsies with adult tick attached. Conclusions: local immune response of the cattle used in the present study against tick is manifested by the innate immune response composed by granulocytes and mononuclear cells. There was verified the increment of cellular infiltrate composed mostly by eosinophils followed by the increment of lymphocyte and plasmocytes. However, the methodology used in the present study should be improved to determine whether basophils, dendritic cells subsets and gamma delta T lymphocytes are involved or not in the cattle immune response against tick using another approach. The present study is an inclusive case of study and it should be expanded considering initial tick life stages and more skin structure components and its interaction with tick.