Remodelação tecidual no endométrio equino : fibras de colágenos e colagenases

Abstract

A remodelação tecidual no endométrio de éguas ocorre durante a patogênese da endometrose, este processo é caracterizado pela mudança no perfil dos componentes da matriz extracelular. Esse distúrbio degenetarivo crônico cuminará com a modificação da arquitetura e funcionalidade no útero de éguas. O objetivo do presente estudo foi quantificar morfometricamente a deposição de colágeno endometrial e avaliar a expressão gênica de colágeno tipo 2 (COL-2), tipo 3 (COL-3), metaloproteinases de matriz 1 (MMP-1) e 2 (MMP-2), seu inibidor tecidual (TIMP-2) e fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) em biópsias uterinas de éguas com diferentes graus de fibrose. Uma amostra uterina foi obtida através de biópsia transvaginal de éguas cíclicas (n=34) entre o dia 5 e dia 10 pós-ovulação e foi seccionada em dois fragmentos. Um fragmento foi utilizado para avaliação histopatológica e o outro foi encaminhado para análise de expressão gênica. Na histologia as amostras foram classificadas e agrupadas conforme frequência e distribuição das alterações relacionadas à fibrose no endométrio em Grau I (n=12), Grau II (n=12) e Grau III (n=10). A quantificação de colágeno foi determinada através da coloração Sirius Red, onde se detectou uma variação na deposição de colágeno nos grupos Grau I (11,72 ± 1,394 %), Grau II (17,76 ± 1,296 %) e Grau III (24,15 ± 1,870 %). Nas avaliações de transcritos identificou-se maior expressão de COL-2 nas amostras de éguas Grau II comparada ao Grau I e Grau III. O COL-3 não presentou diferenças significativas quando submetidos às análises estatísticas. A MMP-1 apresentou aumento na expressão de mRNA nas amostras endometriais do Grau II vs Grau III. Maior expressão de MMP-2 foi observada nas éguas Grau III comparada a éguas Grau I e Grau II. A TIMP-2 exibiu menor expressão de mRNA no Grau III vs Grau I e Grau II. A expressão gênica do TNF-α endometrial foi significativamente maior nas fêmeas Grau II que Grau I e Grau III. Em conclusão, os resultados encontrados elucidam parte dos mecanismos envolvidos na patogênese da fibrose endometrial na égua. Nesta pesquisa ficou demonstrado que a alteração na quantificação das fibras de colágeno e na expressão de colagenases e seu inibidor tecidual estão envolvidos no processo de fibrogênese e fibrinólise endomentrial. Assim a expressão de COL-2 MMP-1, MMP-2, TIMP-2 e TNF-α pode modular a reorganização tecidual e representar importantes marcadores no diagnóstico de éguas com endometrose.

Tissue remodeling in the mares endometrium occurs during the pathogenesis of endometrosis, this process is characterized by a change in the profile of the extracellular matrix components. This chronic degenerative disorder will cumin with the modification of the architecture and functionality in the uterus of mares. The aim of the present study was to morphometrically quantify the deposition of endometrial collagen and to evaluate the gene expression of collagen type 2 (COL-2), type 3 (COL-3), matrix metalloproteinases 1 (MMP-1) and 2 (MMP- 2), its tissue inhibitor (TIMP-2) and tumor necrosis factor alpha (TNF-α) in uterine biopsies from mares with different degrees of fibrosis. A uterine sample was obtained by transvaginal biopsy of cyclic mares (n = 34) between day 5 and day 10 post-ovulation and was divided into two fragments. One fragment was used for histopathological evaluation and the other was sent for analysis of gene expression. In histology the samples were classified and grouped according to the frequency and distribution of changes related to fibrosis in the endometrium in Grade I (n = 12), Grade II (n = 12) and Grade III (n = 10). The quantification of collagen was determined using Sirius Red staining, where a variation in collagen deposition was detected in the Grade I (11.72 ± 1.394%), Grade II (17.76 ± 1.296%) and Grade III (24, 15 ± 1.870%). In the transcript evaluations, greater COL-2 expression was identified in the samples of Grade II mares compared to Grade I and Grade III. COL-3 showed no significant differences when submitted to statistical analysis. MMP-1 showed an increase in mRNA expression in Grade II vs Grade III endometrial samples. Higher expression of MMP-2 was observed in Grade III mares compared to Grade I and Grade II mares. TIMP-2 exhibited less mRNA expression in Grade III vs Grade I and Grade II. Gene expression of endometrial TNF-α was significantly higher in Grade II than Grade I and Grade III females. In conclusion, the results found elucidate part of the mechanisms involved in the pathogenesis of endometrial fibrosis in the mare. In this research it was demonstrated that the alteration in the quantification of collagen fibers and in the expression of collagenases and their tissue inhibitor are involved in the process of fibrogenesis and endomentrial fibrinolysis. Thus, the expression of COL-2 MMP-1, MMP-2, TIMP-2 and TNF-α can modulate tissue reorganization and represent important markers in the diagnosis of mares with endometrosis.