Linfadenite granulomatosa em suínos no Brasil : caracterização histopatológica e micobactérias identificadas

Abstract

Entre os anos 2012 e 2014, a linfadenite granulomatosa (LG) em suínos representou 99% de todas as lesões associadas a zoonoses nos frigoríficos brasileiros. O Mycobacterium avium hominissuis (MAH) é a principal subespécie das micobactérias associada à LG em suínos, com raros casos atribuídos as micobactérias do Complexo Mycobacterium tuberculosis. As lesões macroscópicas, histopatológicas e técnica de Ziehl-Neelsen (ZN) não definem a espécie de micobactéria envolvida na LG. O padrão ouro de diagnóstico é o isolamento de micobactérias, seguido de técnicas moleculares. Este estudo teve como objetivo pesquisar a etiologia da LG no Brasil para atualizar os dados nacionais, e padronizar a técnica de Hibridização in situ Fluorescente (FISH) em linfonodos parafinizados de suínos com LG. No ano de 2017 o Serviço de Inspeção Federal (SIF) coletou em 19 frigoríficos, 637 linfonodos de suínos com lesões granulomatosas, com origem em oito estados brasileiros. As amostras foram submetidas a exame histopatológico, técnica histoquímica de ZN, isolamento de micobactérias, Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e FISH. De acordo com o conhecimento dos autores esta é a primeira tentativa descrita na literatura de padronização da técnica de FISH em tecidos parafinizados de suínos. A lesão histopatológica granulomatosa foi observada em 85,1% dos tecidos linfoides. A taxa de isolamento de micobactérias foi de 32,08% (128/399), destas 76,56% (98/128) origens foram positivas para MAH, 1,56% (2/128) origens positivas para Mycobacterium bovis (M. bovis), 21,87% (28/128) origens positivas e 10 origens negativas para o gênero Mycobacterium spp. Observou-se bacilos-álcool ácido resistentes (BAAR) em 71,7% das amostras de MAH, em 75% das amostras de Mycobacterium spp., e em uma amostra (1/3) M. bovis. Das amostras positivas para BAAR no tecido, 60,47% não isolaram ou foram negativas na técnica da PCR para Mycobacterium spp. A FISH não apresentou resultados positivos em linfonodo parafinizado de suínos. O MAH foi à subespécie mais diagnosticada na LG em suínos do Brasil, com apenas duas origens positivas para M. bovis. Os resultados obtidos neste estudo ficam a disposição para analises de risco, para subsidiar políticas públicas relacionadas à inspeção assim como programas de vigilância de tuberculose suína.

Granulomatous lymphadenitis (GL) in pigs represents 99% of all lesions associated with zoonoses in Brazilian slaughterhouses between 2012 and 2014. Mycobacterium avium hominissuis (MAH) is the main subspecies of mycobacteria associated with GL in pigs, and few cases are attributed to the Complex Mycobacterium tuberculosis. The macroscopic, histopathological and Ziehl-Neelsen (ZN) lesions do not define the mycobacterial species involved in GL. The isolation of mycobacteria is the gold standard for diagnosis. Molecular techniques are also used for subspecie determination. The aim of this study was to investigate the etiology of granulomatous lesions for the validation of national data regarding this lesion in pigs and to standardize a fluorescence in situ hybridization (FISH) test in formalin-fixed lymph nodes with granulomatous lesions. In 2017, federal veterinary meat inspectors collected 637 mesenteric lymph nodes with granulomatous lesions from 19 slaughterhouses. Granulomatous histopathological lesions were observed in 85.1% of the lymphoid tissues. The isolation rate of mycobacteria was 32.08%, of these isolates 76.56% were MAH positive, 1.56% for Mycobacterium bovis (M. bovis) and 21,87% for Mycobacterium spp. Acid-alcohol resistant bacillus (BAAR) was observed in 71.7% of the MAH samples, in 75% of the samples of Mycobacterium spp, and in one sample of M. bovis. The standardization of the FISH technique in formalin-fixed porcine lymph nodes was unsuccessful. MAH was the most diagnosed subspecies involved in GL in pigs, with only two positive for M. bovis. The results of this study are available for risk analysis to support inspection-related public policies as well as swine tuberculosis surveillance programs.