Estudo do polimorfismo CCR2-64I em pacientes infectados pelo HCV

Abstract

A infecção pelo vírus da hepatite C (HCV) é caracterizada por um amplo espectro de doenças hepáticas que podem ser sintomáticas ou assintomáticas, apresentando uma fase crônica persistente. O processo inflamatório contínuo estabelecido no fígado pode levar ao desenvolvimento de fibrose, que pode evoluir para cirrose e hepatocarcinoma (HCC). Quimiocinas e citocinas desempenham papéis importantes na depuração viral, controle de infecção, inflamação, regeneração e fibrose, e também estão implicadas nos processos patológicos que ocorrem no fígado durante a infecção viral. CCR2 é um receptor de quimiocinas envolvido na migração celular, em processos inflamatórios e na regulação do sistema imunológico. Nesse sentido, o gene CCR2 pode estar associado à atividade tumoral no hospedeiro. É importante ressaltar que ainda há muitas questões sobre o significado funcional da molécula CCR2 no desenvolvimento e progressão do tumor. Assim, o objetivo do presente estudo foi investigar a associação potencial da variante genética do CCR2-64I em pacientes HCV positivos (HCV +) com diferentes perfis clínicos. Foram avaliadas 293 amostras de indivíduos de Porto Alegre HCV + coletadas no Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). As amostras foram genotipadas através da técnica Polimorfismo do Tamanho dos Fragmentos de Restrição (RFLP) utilizando primers específicos. As frequências genotípicas foram testadas para Equilíbrio de Hardy-Weinberg através do teste do chi-quadrado. As frequências alélicas e genotípicas foram comparadas com dados de um grupo controle (n=118) obtido de um trabalho já publicado pelo grupo do Laboratório de Imunobiologia e Imunogenética da UFRGS (Zambra et al., comunicação pessoal). Para as comparações entre grupos, foi utilizado o teste do chi-quadrado com correção de Yates ou o teste exato de Fisher. O valor de p <0,05 foi estabelecido 2 como estatisticamente significativo. Este estudo foi aprovado pelos Comitês de Ética das instituições envolvidas na coleta da amostra e todos os participantes assinaram o termo de consentimento. As freqüências genotípicas estavam de acordo com o Equilíbrio de Hardy-Weinberg. Considerando as frequências genotípicas, as comparações entre o grupo HCV+ e grupo controle (p=0.123), grupo HCV+/grupo fibrose e grupo controle (p=0.733), grupo HCV+/grupo cirrose e grupo controle (p=0.309), grupo HCV+/grupo HCC e grupo controle (p=0.132) não apresentaram diferenças estatisticamente significativas. Da mesma forma, não houve diferença estatisticamente significativa quando os grupos foram comparados em relação às frequências alélicas (p>0.05). A variante CCR2-64I não influenciou diretamente a suscetibilidade à infecção pelo HCV, ou os desfechos avaliados (isto é, desenvolvimento de fibrose, cirrose e CHC). No entanto, ainda existem inconsistências e dúvidas na literatura científica sobre o papel dessa variante genética em diferentes aspectos da infecção pelo HCV. Além disso, a função do CCR2 nas respostas imunológicas sugere que o polimorfismo CCR2-64I pode ter papéis importantes nos desfechos clínicos associados à infecção pelo HCV.

Hepatitis C virus (HCV) infection can be associated to a wide spectrum of liver diseases which can be symptomatic or asymptomatic, presenting a persistent chronic phase. The continuous inflammatory process established in the liver can leads to the development of fibrosis, which can progress to cirrhosis and hepatocarcinoma (HCC). Chemokines and cytokines play important roles in viral clearance, infection control, inflammation, regeneration, and fibrosis, and are also implicated in the pathological processes that occur in the liver during viral infection. CCR2 is a chemokine receptor involved in cell migration and in inflammatory processes and in immune system regulation. In this sense, the CCR2 molecule can be associated to the tumor activity in the host. Importantly, there are still many questions about the functional significance of the CCR2 molecule in tumor development and progression. Thus, the aim of the present study was to investigate the potential association of the CCR2- 64I genetic variant in HCV positive patients with different clinical profiles. We evaluated 293 samples of HCV + individuals from Porto Alegre collected at the Hospital de Clínicas, Porto Alegre. The samples were genotyped by Restriction Fragment Size Polymorphism (RFLP) technique using specific primers. For analysis, genotypic frequencies were tested for Hardy-Weinberg Equilibrium using chi-square test. The allele and genotype frequencies were compared with a control group (n=118) previously evaluated in the Laboratory of Immunobiology and Immunogenetics of UFRGS (Zambra et al., personal communication). For the comparisons between groups, the chi-square test with Yates correction or Fisher’s exact test was used. The value of p <0.05 was established as statistically significant. This study was approved by the Ethics Committees of the institutions involved in the sample collection and all participants signed a consent form. The genotypic 4 frequencies were in agreement with the Hardy- Weinberg equilibrium. Considering the genotypic frequencies, the comparisons between the HCV + group and the control group (p=0.123), HCV + group/ fibrosis group and control group (p=0.733), HCV + group / cirrhosis group and control group (p=0.309) and HCV + group / HCC group and control group (p=0.132) did not present statistically significant differences. Similarly, there was no statistically significant difference when groups were compared in relation to allele frequencies (p<0.05). The CCR2-64I variant did not directly influence the susceptibility to HCV infection, or the evaluated outcomes (i.e. development of fibrosis, cirrhosis and HCC). However, there are still inconsistencies and doubts in the scientific literature about the role of this genetic variant on different aspects of the HCV infection. In addition, the function of CCR2 in immunological responses suggests that the CCR2-64I polymorphism may have important roles in clinical outcomes associated to HCV infection.