Análise proteômica de Mesocestoides corti durante o processo de estrobilização in vitro

Abstract

Em Cestódeos, o processo de estrobilização é aquele que leva ao desenvolvimento da fase adulta a partir da larva, conferindo uma grande vantagem adaptativa a esses organismos através do aumento da fecundidade e dispersão. Mesocestoides corti vem sendo utilizado como modelo de estudos de diversos aspectos envolvidos na estrobilização. Neste trabalho, empregaram-se abordagens proteômicas no estudo de tetratirídeos que foram expostos ou não a tratamento de indução de segmentação (IN e TT, respectivamente): eletroforese bidimensional (2DE) seguida de MALDI-TOF MS ou MS/MS e a análise de extratos por LC- ESI-Q-TOF MS/MS. Através da 2DE-MALDITOF MS ou MS/MS, foram definidos os padrões 2DE de TT e IN nas faixas de pH 3-10 e 4-7. Foi possível identificar sete proteínas e obter dados de massa para mais 106 spots em tetratirídeos, e uma proteína e 66 spots em tetratirídeos após indução de estrobilização. Quando o perfil eletroforético das amostras foi analisado, foram evidenciados 102 spots diferencialmente expressos. Através de LC-ESI-Q-TOF MS/MS, foram identificadas 80 proteínas entre as duas fases, sendo 17 exclusivas de TT, 21 exclusivas de IN e 42 comuns a ambas. Essas proteínas foram caracterizadas funcionalmente em 18 grupos de acordo com o Dentre as proteínas identificadas, foram verificadas algumas com funções secundárias relacionadas ao controle de expressão gênica e algumas com papel relacionado à imunogenicidade do hospedeiro. Através da análise do emPAI das proteínas nos dois extratos, foram verificadas 12 proteínas com alterações quantitativas na expressão. Dessa forma, através desse trabalho, foi possível a caracterização preliminar dos perfis protéicos de tetratirídeos e induzidos, obtendo-se alguns indícios dos mecanismos envolvidos na diferenciação de M. corti em nível proteômico.

In Cestodes, the strobilation process leads to the development of the adult form from the larvae, giving a great adaptative advantage to these organisms by increasing the fecundity and spread. Mesocestoides corti has been used as a model for the study of varius aspects involved in strobilation. In this study we employed proteomic approaches in the study of tetrathyridia that had been exposed or not to segmentation induction treatment (IN and TT, respectively): two0dimensional gel electrophoresis (2DE) followed by MALDITOF MS or MS/MS and analysis of extracts by LC-ESI-Q-TOF MS/MS were performed. By 2DE-MALDI-TOF MS or MS/MS the proteomic profile of TT and IN on the pH range of 4-7 and 3-10 were defined. Seven proteins could be identified and mass data for further 106 spots were obtained for TT samples, and, from IN samples, one protein was identified and mass data was obtained for 66 spots. When 2DE profiles of TT and IN were compared, 102 spots were differentially expressed. Through LC-ESI-Q-TOF MS/MS, 80 proteins were identified within two samples, 17 exclusive from TT, 21 from IN and 42 common to both. These proteins were function characterized in 18 groups according to KOG. Among the proteins identified, we observed some with secondary roles related to gene expression control and some related to host immunogenicity. Through emPAI analysis, 12 showed quantitative differences in expression. Through this work, it was possible to preliminarily characterize the protein profiles of TT and IN and, thus, obtain some evidence of the mechanisms involved in the differentiation of M. corti in the proteomic level.