Análise em microscopia confocal da viabilidade bacteriana após a remoção total de tecido cariado

Abstract

O objetivo do presente estudo foi avaliar, in vivo, a quantidade e a viabilidade bacteriana após a remoção total de tecido cariado através da Microscopia de Varredura a Laser Confocal (MVLC). Foram selecionados 4 pacientes apresentando lesão de cárie restrita a superfície oclusal de molares permanentes localizadas radiograficamente em terço médio de dentina. Nesses dentes foi realizada a remoção total de tecido cariado (RTTC) e selamento provisório da cavidade. Durante o atendimento clínico foi coletada uma amostra dentina inicial e uma amostra de dentina após a RTTC, que foram transportadas com RTF para análise MVLC. As amostras foram coradas com SYTO9 e iodeto de propídeo. A quantidade bacteriana foi classificada com os escores: 0= ausência de bactérias e de + até ++++ de acordo com a quantidade e a viabilidade bacteriana nos escores: 0 = sem viabilidade; 1 = < 10% ; 2 = >10% a 50%<; 3 = >50% a 90%<; 4 = >90%. A dentina cariada superficial apresentou grande quantidade de bactérias ++++, porém a taxa de viabilidade bacteriana foi < 10%. Após a remoção total de tecido cariado as amostras de dentina apresentaram uma diminuição na quantidade de bactérias (+ até +++), observando-se um aumento na proporção de bactérias viáveis (de < 10% até >50% a <90%). O método de Microscopia de Varredura a Laser Confocal, além de mostrar a quantidade de bactérias presentes após a RTTC, diferenciou as bactérias viáveis das não viáveis. Podendo ser utilizado na avaliação das terapias clínicas de atividade cárie.

The aim of this study was to evaluate in vivo the amount and bacterial viability after complete removal of caries using Confocal Laser Scanning Microscope (CLSM). Four patients were selected with carious lesions restricted to the occlusal surface of permanent molars located radiographically in the middle third of dentin. In total removal of caries (RTTC) was performed tempory followed by sealing of the cavity. During clinical treatment, dentin samples were collected before and and after RTTC, which were transported with RTF for analysis in CLSM. The samples were stained with propidium iodide and SYTO9. The bacterial quantity was scored from + to + + + + and the bacterial viability scores were: 0 = no viability, 1 = < 10%; 2 = >10% to 50%<; 3 = >50% to 90%<; 4 = >90%. The dentine surface showed a great amount bacteria ++++, but the rate of bacterial viability was <10%. After the complete removal of carious tissue samples of dentin showed a decrease in the amount of bacteria (+ to +++), however observed an increase in the proportion of viable bacteria (<10% and >50% to 90%<). Was observed the method of Confocal Laser Scanning Microscope besides showing the amount of bacteria present after the RTTC, was able to differentiates viable bacteria from non-viable. This is can be used in the evaluation of clinical therapies for bacterial carious.