Acúmulo de mimosina em Leucaena leucocephala em resposta a etileno, diferentes auxinas e nitrato de prata

Abstract

Mimosina é um aminoácido não-protéico encontrado na leguminose forrageira Leucaena leucocephala, o qual possui propriedades interessantes como efeito antimitótico, inibidor de apoptose neuronal e atividade alelopática. Experimentos anteriores de nosso grupo mostraram que o acúmulo deste aminoácido é estimulado por dano mecânico, ácido salicílico (sinalizador de ataque por patogênico) e pela auxina Acido Naftaleno acético (ANA). No presente estudo, objetivou-se esclarecer o papel do etileno (utilizando-se um precursor sintético como fonte deste fitormônio - Ethrel - e um inibidor de ação do mesmo - nitrato de prata) no acúmulo de mimosina, visto que auxinas frequentemente agem via indução de etileno, bem como o efeito da estabilidade de auxinas na produção deste aminoácido. Plantas desenvolvidas assepticamente n vitro foram transferidas (após abertura cotiledonar) para substrator de vermiculita, onde permaneceram uma semana em adaptação recebendo meio MS 0,1X. Durante a exposição aos tratamentos, os frascos contendo as plantas foram irrigados com meio MS 0,1X e por aspersão até o ponto de escorrimento iminente (três vezes ao dia para evitar efeitos circadianos) recebiam os diferentes tratamentos: AIA (10 e 100 ppm), ANA (100 ppm), Ethrel (100 ppm), 49 μM de nitrato de prata (AgNO3) adicionados de 10 ppm de AlA ou somente água. Foi utilizada uma concentração equimolar (7 μM) de NaNO3, nas plantas sem AgNO3, a temperatura foi de 28 = 2°C e fotoperíodo de 16h (rad. fotos, ativ. Aprox, 70 μmol.m-2, s-1). Após 2, 4 e 6 dias, as plântulas foram pulverizadas em nitrogênio líquido e após eram extraídos em HCI 0,1 M. Os extratos (quadriplicatas) foram fracionados por cromatografia em papel, e a análise quantitativa de mimosina foi realizada por ensaio espectrofotométrico (reação com p-nitroanilina diazotada). As plantas expostas à auxina AIA aumentaram significativamente seu teor em relação ao controle em todos os dias e concentrações (10 e 100 ppm) examinados. Já as plantas expostas à auxina ANA apresentaram um aumento na quantidade do aminoácido apenas nos dias 2 e 4. As plantas expostas ao precursor de etileno Ethrel tiveram um aumento significativo no teor de mimosina nos dias 2 e 4, porém no dia 6 houve uma queda em relação ao controle. No tratamento em que as plantas eram expostas a Nitrato de Prata e AIA 10 ocorreu um aumento significativo no dia 2 e 4, igualando-se a condição controle no dia 6. os resultados sugerem que a indução de produção de mimosina por auxinas envolve ação direta em um primeiro momento, seguida de ação conjunta com etileno, em um segundo momento, com efeito também positivo na produção de mimosina. O uso de precursores diretos de etileno causam indução na produção de mimosina em etapas iniciais de exposição passando a inibir o mesmo processo em concentrações mais elevadas possivelmente por induzir a senescência foliar.