Sistemas nanoestruturados contendo óleo essencial de Otacanthus azureus (Linden) Ronse e Clioquinol para tratamento tópico de onicomicoses : desenvolvimento tecnológico, avaliação in vitro da permeação ungueal, e toxicidade

Abstract

Onicomicoses são infecções fúngicas do aparato ungueal de alta incidência na população mundial. Seu tratamento enfrenta desafios relacionados à dificuldade de obtenção de concentrações terapêuticas satisfatórias na região infectada, tanto na administração por via oral quanto por via tópica devido a características intrínsecas da via, além da alta taxa de recorrência, desenvolvimento de cepas resistentes aos antifúngicos disponíveis e limitado arsenal terapêutico para o tratamento de infecções fúngicas. O uso de óleos essenciais no desenvolvimento de novas alternativas ao tratamento destas infecções se mostra uma estratégia promissora. O óleo essencial de Otacanthus azureus (OEOA) é um produto natural pouco estudado, porém já tendo sido descrito na literatura seu potencial como antifúngico. Neste trabalho a atividade antidermatofítica deste óleo foi investigada, bem como sua associação a antifúngicos sintéticos, tendo sido observado efeito aditivo quando da associação com clioquinol (CLI). Com vistas ao desenvolvimento de sistemas nanoestruturados contendo OEOA e CLI para tratamento tópico de onicomicoses e a viabilizar a avaliação da performance destas formulações, uma metodologia bioanalítica, capaz de analisar simultaneamente ambos analitos, de forma rápida e eficiente, foi desenvolvida e validada. Nanoemulsões contendo OEOA e CLI foram preparadas por microfluidização e caracterizadas, demonstrando estabilidade físico-química pelo período de 28 dias. OEOA, CLI e as nanoemulsões produzidas foram avaliadas quanto ao potencial irritante, não tendo sido observada irritação em modelo in vitro para CLI, OEOA e as formulações testadas, sugerindo segurança para administração por vias tópicas. Por fim, ensaios de avaliação da permeação/retenção in vitro, utilizando casco suíno como membrana de difusão, demonstrou que a incorporação de CLI em naoemulsões apresentou perfil de liberação sustentada, aumentou em até 3 vezes a retenção de CLI em membranas de casco suíno, e que a presença do óleo essencial na formulação, para além de sua atividade antifúngica, promoveu aumento significativo da retenção de CLI.

Onychomycosis are fungal infections of the nail apparatus with a high incidence in the world population. Its treatment faces challenges related to the difficulty of obtaining satisfactory therapeutic concentrations in the infected region, both in oral and topical administration routes due to intrinsic characteristics of the ungual route, in addition to the high rates of recurrence, development of fungal strains resistant to available antifungals and limited therapeutic arsenal for the treatment of fungal infections. The use of essential oils in the development of new alternatives for the treatment of these infections is a promising strategy. The essential oil of Otacanthus azureus (OAEO) is a natural product with few studies concerning its therapeutical activities, however its potential as an antifungal has been previously described in the literature. In this work, the antidermatophytic activity of OAEO was investigated, as well as its association with synthetic antifungals, with additive effect being observed upon the association with clioquinol (CLI). Aiming to the development of nanostructured systems containing OAEO and CLI for the topical treatment of onychomycosis and to enable the evaluation of the performance of these formulations, a bioanalytical methodology, capable of simultaneously analyzing both analytes in a fast and efficient way, was developed and validated. Nanoemulsions containing OAEO and CLI alone or in combination were prepared using the microfluidization technique and characterized, demonstrating physicochemical stability for a period of 28 days. OAEO, CLI and the produced nanoemulsions were evaluated for their irritant potential, with no irritation observed for CLI, OAEO and the tested formulations, suggesting safety for administration by topical routes. Finally, in vitro permeation/retention tests, using porcine hoof as a diffusion membrane, demonstrated that the incorporation of CLI in nanoemulsions presented a sustained release profile, increased up to 3-fold the retention of CLI in pork hoof membranes, and that the presence of essential oil in the formulation, apart of its antifungal activity, promoted a significant increase in CLI retention.