Avaliação da expressão de HLADR em monócitos e CD64 em neutrófilos como preditor do processo inflamatório infeccioso

Abstract

A sepse é uma doença que afeta mundialmente mais de 15 milhões de pessoas todos os anos, sendo, até hoje, uma das doenças de maior mortalidade no Brasil e no mundo, principalmente pela sua rápida evolução para os estados de sepse grave e, posteriormente, choque séptico. O diagnóstico atual da sepse é feito por meio da identificação de pelo menos dois sintomas de SIRS (Síndrome da Resposta Inflamatória Sistêmica), juntamente com a confirmação da presença de microrganismos por meio do exame de hemocultura, e, só após a confirmação do diagnóstico é iniciado o tratamento antimicrobiano adequado ao paciente. Alguns biomarcadores já são utilizados para auxiliar este diagnóstico, como o aumento de PCR (Proteína C Reativa), leucócitos, IG (Immature Granulocytes) e bastões. Além destes, estudos têm mostrado a relação da expressão de alguns receptores de antígenos nas células de defesa do organismo com o estado infeccioso do mesmo. O CD64 (FcyRI) é um receptor normalmente expresso em monócitos, porém, em caso de infecção é vista que sua expressão se dá fortemente em neutrófilos. Paralelo a isto, o marcador do MHC de classe II, HLADR, diminui sua expressão em monócitos em resposta à infecção. Estudos anteriores feitos em neonatos mostram a possibilidade da utilização de um “Índice de Sepse” (SI), dado pela razão dos dois biomarcadores anteriormente citados, no prognóstico da sepse. Neste estudo transversal foram analisadas amostras de 77 pacientes adultos internados no Hospital de Clínicas de Porto Alegre, posteriormente divididos em dois grupos: Não Sepse/SIRS (n=44) e Sepse/SIRS (n=33); em que foram classificados a partir de parâmetros clínicos e laboratoriais. As amostras selecionadas foram analisadas por citometria de fluxo, foi identificada a expressão de CD64 e HLADR em MFI e calculado o índice de sepse para cada paciente. Nas análises estatísticas foram calculadas a sensibilidade e especificidade de cada marcador e comparadas aos marcadores já estabelecidos para diagnóstico. Todos os três parâmetros demostraram diferença significativa na expressão quando comparados entre os dois grupos, e em comparação com os testes laboratoriais já utilizados, mostrando que o uso de HLADR, CD64 e do novo índice é mais sensível e específico na identificação da sepse.

Sepsis is a disease that affects over 15 million people worldwide every year and remains one of the leading causes of mortality in Brazil and around the world, particularly due to its rapid progression to severe sepsis and subsequently, septic shock. Currently, sepsis diagnosis is based on the identification of at least two SIRS (Systemic Inflammatory Response Syndrome) symptoms along with confirmation of the presence of microorganisms through blood culture examination. Only after confirming the diagnosis is appropriate antimicrobial treatment initiated for the patient. Some biomarkers are already used to aid in this diagnosis, such as increased CRP (C Reactive Protein), leukocytes, IG (Immature Granulocytes), and bands. In addition, studies have shown the relationship between the expression of some antigen receptors in the body's defense cells and its infectious state. CD64 (FcyRI) is a receptor typically expressed in monocytes; however, in the case of infection, its expression is strongly observed in neutrophils. Concurrently, the class II MHC marker, HLADR, decreases its expression in monocytes in response to infection. Previous studies done in neonates show the possibility of using a "Sepsis Index" (SI), given by the ratio of the two biomarkers previously mentioned, in the prognosis of sepsis. In this cohort study, 77 adult patients admitted to the Hospital de Clínicas de Porto Alegre were recruited and subsequently divided into two groups: Non-Sepsis/SIRS (n=44) and Sepsis/SIRS (n=33), classified based on clinical and laboratory parameters. The selected samples were analyzed by flow cytometry, and the expression of CD64 and HLADR in MFI was identified, and the sepsis index was calculated for each patient. In the statistical analyses, the sensitivity and specificity of each marker were calculated and compared to established diagnostic markers. All three parameters showed a significant difference in expression when compared between the two groups and compared with the laboratory tests already in use, demonstrating that the use of HLADR, CD64, and the new index is more sensitive and specific in identifying sepsis.