Quantificação dos níveis de beta-endorfina sérica em ratos näive submetidos a sessão única de estimulação transcraniana por corrente contínua bimodal

Abstract

A Estimulação Transcraniana por Corrente Contínua (ETCC) tem mostrado resultados promissores em diferentes condições neurológicas, incluindo a dor. Dados prévios deste grupo indicam que uma única exposição à ETCC bimodal foi capaz de aumentar o limiar nociceptivo mecânico e térmico por até 60 minutos em ratos naïve. Os mecanismos responsáveis por tais alterações comportamentais podem ser entendidos por meio de análises bioquímicas. Um dos possíveis sistemas relacionados ao efeito analgésico observado é o sistema opiáceo endógeno. Sabe-se que este sistema se relaciona com respostas comportamentais de analgesia e tem rápida ativação. Entre os diferentes neurotransmissores, a beta-endorfina tem papel de destaque. Desta forma, o presente trabalho tem por objetivo quantificar os níveis séricos de beta-endorfina em ratos naïve expostos a sessão única de ETCC bimodal. Este é um trabalho de reaproveitamento de material biológico (projeto 16- 0408). Foram utilizadas amostras de soro de 72 ratos Wistar, machos, divididos em 9 grupos experimentais: CONTROLE, ETCC30, ETCC60, ETCC120, ETCC24, SHAM ETCC30, SHAM ETCC60, SHAM ETCC120 e SHAM ETCC24. Os animais receberam ETCC bimodal sobre córtex motor primário (M1) por 20 minutos e foram eutanasiados dentro do período previsto para cada grupo (30, 60, 120 minutos e 24 horas). Os grupos Sham ETCC receberam estimulação falsa, onde os animais passaram pelos mesmos procedimentos, mas com os eletrodos desligados. O soro foi coletado e armazenado a -80ºC. A dosagem de betaendorfina foi realizada por Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). A análise estatística foi feita por ANOVA de duas vias e de uma via, seguidas de teste LSD de Fisher (P<0,05). Os resultados deste trabalho serão importantes na elucidação dos mecanismos de modulação do processamento nociceptivo pela ETCC.

Transcranial Direct Current Stimulation (tDCS) has shown promising results in different neurological conditions, including pain. Previous data from this group indicate that a single exposure to bimodal tDCS was able to increase the mechanical and thermal nociceptive threshold for up to 60 minutes in naïve rats. The mechanisms responsible for such behavioural changes can be understood through biochemical analyses. One of the possible systems related to the observed analgesic effect is the endogenous opioid system. It is known that this system is related to behavioural analgesia responses and has rapid activation. Among the different neurotransmitters, beta-endorphin has a prominent role. Thus, the present work aims to quantify the serum levels of beta-endorphin in naïve rats exposed to a single session of bimodal tDCS. This is a work on the reuse of biological material (project 16-0408). Serum samples from 72 male Wistar rats were divided into 9 experimental groups: CONTROL, tDCS30, tDCS60, tDCS120, tDCS24, SHAM tDCS30, SHAM tDCS60, SHAM tDCS120 and SHAM ttc24. The animals received bimodal tDCS over the primary motor cortex (M1) for 20 minutes and were euthanized within the period provided for each group (30, 60, 120 minutes and 24 hours). The Sham tDCS groups received sham stimulation, where the animals underwent the same procedures, but with the electrodes turned off. Serum was collected and stored at -80ºC. Betaendorphin dosage was performed by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Statistical analysis was performed by two-way and one-way ANOVA, followed by Fisher's LSD test (P<0.05). The results of this work will be important in the elucidation of the mechanisms of nociceptive processing modulation by tDCS.