Efeitos citotóxicos, de migração e angiogênese da terapia fotodinâmica e fotobiomodulação nas células envolvidas na terapia de revascularização

Abstract

O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da Terapia Fotodinâmica (PDT) e da Fotobiomodulação (PBM) como terapias complementares ao protocolo de revascularização pulpar, em cultura celular primária de células da papila apical humana (APCs) e em células endoteliais (HUVECs). Dois primeiros pré-molares inferiores com um canal foram seccionados, simulando dentes com rizogênese incompleta, e um dos canais foi irrigado com 1mL de azul de metileno 0.005%. A seguir, os dois canais foram irrigados com 20mL de Hipoclorito de sódio (NaOCl) 1.5% e 20mL de EDTA. Antes de cada ensaio, as soluções químicas obtidas foram diluídas em meios de cultura na concentração de 0.5% (NaOCl + EDTA 0.5%; NaOCl + EDTA + MB 0.5%). O efeito da PDT e da PBM em cultura de células foi avaliado por meio dos seguintes grupos: CTG (meio de cultura); ISG (NaOCl + EDTA 0.5%); MBG (MB + NaOCl + EDTA 0.5%); PBMG (NaOCl + EDTA 0.5% + laser); PDTG (NaOCl + EDTA + MB 0.5% + laser). Foram realizados os ensaios de citotoxicidade em APCs, de índice de polaridade em APCs, migração celular em APCs e angiogênese em HUVECs. Os dados obtidos foram analisados pelo ANOVA, seguido do teste de Tuckey (P≤0.05). A PDT e a PBM aumentaram a viabilidade celular em comparação com os grupos ISG e MBG, respectivamente. Todos os protocolos testados reduziram a migração celular em comparação com CTG. A PBMG mostrou maior distância de migração das HUVECs em comparação a ISG, evidenciando um potencial de angiogênese. Conclui-se que a PBM e a PDT têm potencial para serem empregadas como terapias coadjuvantes ao protocolo de revascularização pulpar em dentes com rizogênese incompleta.

The aim of this study was to evaluate photodynamic therapy (PDT) and photobiomodulation therapy (PBM) as complementary therapies on a pulp revascularization protocol using primary culture of cells from apical papilla (APCs) and endothelial cells (HUVECs). In order to simulate tooth with open apex, two mandibular first premolars with a single canal were sectioned and one of the root canal was irrigated with 1mL of 0.005% methylene blue (MB). Next, the root canal was irrigated with 20mL of 1.5% sodium hypochlorite (NaOCl) and 20mL of 17% EDTA. The chemical solution obtained was diluted in cell culture media previous to each experiment (NaOCl + EDTA 0.5%; NaOCl + EDTA + MB 0.5%). The effect of PDT and PBM was evaluated accordingly to these groups: CTG (cell culture media); ISG (NaOCl + EDTA 0.5%); MBG (MB + NaOCl + EDTA 0.5%); PBMG (NaOCl + EDTA 0.5% + laser); PDTG (NaOCl + EDTA + MB 0.5% + laser). It was performed cytotoxic assay, polarity index and migration analysis in APCs and sprouting assay in HUVECs. All data was analyzed by ANOVA followed by Tuckey post-hoc test (P≤0.05). PDT and PBM favored viability compared to ISG and MBG, respectively. All tested protocols reduced cell migration compared to the CTG. PBMG demonstrated increased migration distance of HUVECs when compared to ISG, what might be related to an angiogenesis potential. PBM and PDT have potential to be employed as complementary therapies on pulp revascularization protocol of necrotic tooth with open apex.