Análise dos parâmetros de estresse oxidativo em Mexilhões Perna perna (Linnaeus, 1758) (Mollusca, Bivalvia: Mytilidae) no Litoral Norte do Rio Grande do Sul
Fecha
2016Tutor
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Nivel académico
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Materia
Resumo
O mexilhão Perna perna (Linnaeus, 1758) é amplamente utilizado nos estudos de monitoramento ambiental por suas características filtradoras e ser séssil. Os objetivos deste trabalho foram avaliar as defesas antioxidantes através das atividades das enzimas Catalase (CAT) e Superóxido Dismutase (SOD), além de danos a lipídios (TBARS) e proteínas (resíduos sulfidril e carbonil) em tecido de manto, brânquias e gônadas em mexilhões machos e fêmeas. Analisou-se os espécimes de mexilhão coletados nos v ...
O mexilhão Perna perna (Linnaeus, 1758) é amplamente utilizado nos estudos de monitoramento ambiental por suas características filtradoras e ser séssil. Os objetivos deste trabalho foram avaliar as defesas antioxidantes através das atividades das enzimas Catalase (CAT) e Superóxido Dismutase (SOD), além de danos a lipídios (TBARS) e proteínas (resíduos sulfidril e carbonil) em tecido de manto, brânquias e gônadas em mexilhões machos e fêmeas. Analisou-se os espécimes de mexilhão coletados nos verões de 2013 e 2016, em três pontos do litoral norte do Rio Grande do Sul, com a finalidade de se estabelecer os padrões destas respostas biológicas. Os animais foram transportados sob areação artificial até o Centro Universitário Metodista do IPA onde foram dissecados. As amostras teciduais foram compostas por um “pool” de 3 animais com um “n” de 5 para cada local e sexo. Os ensaios bioquímicos foram realizados no Centro de Estudos em Estresse Oxidativo (Depto. de Bioquímica, ICBS, UFRGS) onde as amostras foram homogeneizadas, a quantidade protéica determinada pelo método de Lowry (1951) e posteriormente ponderadas para concentrações entre 1-4µg/µl. A atividade da CAT foi analisada pelo método descrito por Aebi (1984) a 240nm. A SOD foi quantificada segundo o método de Boveris (1984) a 480nm. A lipoperoxidação foi avaliada pela formação de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) de acordo com o método de Esterbauer e Chessman (1990) a 532nm. A quantificação dos resíduos sulfidril reduzidos (SH) foram analisados de acordo com a técnica de Ellman (1959) a 412nm. Os danos oxidativos em proteínas foram avaliados determinando os níveis de grupamentos carbonil através do método de Levine (1990) a 360-385nm. Os dados obtidos entre os pontos de amostragem foram analisados por ANOVA de uma via (teste de Duncan) ou por teste T Student para amostras independentes (teste Levene) para comparação de machos e fêmeas. Os resultados foram expressos como média±EPM. Para a enzima SOD, as amostras coletadas no ano de 2016 tiveram uma diminuição na atividade em relação aos outros anos, enquanto a atividade de CAT foi maior que os outros anos para a mesma coleta. A comparação da lipoperoxidação apontou que amostras das fêmeas, em geral, tiveram valores mais que os machos. Nas análises de sulfidril houve diferença entre as coletas e, em tecido de manto apesar de muito elevada, demonstrou o mesmo padrão para todos os anos de coleta. Na análise de carbonil observa-se que para o tecido de manto os machos têm um resultado mais elevado, enquanto que para os tecidos de brânquias e gônadas, as fêmeas têm um maior conteúdo. Os resultados demonstram a importância de se usar amostras de vários tecidos, que podem ter comportamentos diferentes diante dos resultados. Conclui-se que nesse estudo os espécimes de mexilhões machos provavelmente sofreram mais danos oxidativos que as fêmeas, enquanto as fêmeas parecem possuir maior defesa contra o estresse oxidativo. ...
Abstract
The mussel Perna perna (Linnaeus, 1758) is widely used in environmental monitoring studies for its filtering characteristics and to be sessile. The objectives of this work were to evaluate the antioxidant defenses through the activities of the enzymes Catalase (CAT) and Superoxide Dismutase (SOD), besides damage to lipids (TBARS) and proteins (sulfhydryl and carbonyl residues) in mantle tissue, gills and gonads in Males and females mussels. The mussel specimens collected between the summer of 2 ...
The mussel Perna perna (Linnaeus, 1758) is widely used in environmental monitoring studies for its filtering characteristics and to be sessile. The objectives of this work were to evaluate the antioxidant defenses through the activities of the enzymes Catalase (CAT) and Superoxide Dismutase (SOD), besides damage to lipids (TBARS) and proteins (sulfhydryl and carbonyl residues) in mantle tissue, gills and gonads in Males and females mussels. The mussel specimens collected between the summer of 2013 and 2016 were analyzed in three points on the north coast of Rio Grande do Sul, in order to establish the patterns of these biological responses. In order to establish the biological response patterns, transported under artificial sandblasting to the IPA Methodist University Center where they were dissected. The tissue samples were composed of a pool of 3 animals with an "n" of 5 for each site and sex. The biochemical tests were carried out at the Oxidative Stress Center where the samples were homogenized and the protein quantity was determined by the method of Lowry (1951) and the samples were weighed at concentrations between 1-4 μg/μl. CAT activity was analyzed by the method described by Aebi (1984) at 240nm. SOD was quantified by the method of Boveris (1984) at 480nm. Lipoperoxidation was evaluated by the formation of thiobarbituric acid reactive species (TBARS) according to the method of Esterbauer and Chessman (1990) at 532nm. Quantification of reduced sulfhydryl (SH) residues was analyzed according to the Ellman (1959) technique at 412nm. Oxidative damages in proteins were evaluated by determining the levels of carbonyl groups by the Levine method (1990) at 360-385nm. Data were analyzed by one-way ANOVA (Duncan's test) or T-test analysis for independent samples (Levene test) for comparison of males and females. Results were expressed as mean±SEM. The results were compared between the tissues, between the sampling points and between the sexes. For the SOD enzyme, the samples collected in the year 2016 had a reduction in relationship, while the CAT activity was higher for the same collection. The comparison of the lipoperoxidation indicated that samples of the females, in general, had values larger than the males. In sulfhydry analyzes there was a difference in the collection of very high mantle tissue, but it was observed that it maintained the same pattern for the collection years. In the carbonyl analysis it is observed that for the mantle tissue the males have a higher result, whereas for the tissues of gills and gonads, the females present. The results demonstrate the importance of using samples from various tissues, which may have different behaviors in the face of the results. It is concluded that in this study the mussel specimens probably suffered more oxidative damage than the females, while the females seem to have a greater defense against oxidative stress. ...
Institución
Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Instituto de Biociências. Curso de Ciências Biológicas: Ênfase em Biologia Marinha e Costeira: Bacharelado.
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