Determinação de multirresíduos (coccidiostáticos, quinolonas e sulfonamidas) em ovos de galinha poedeira por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectometria de massas em tandem (CLAE-EM/EM)

Abstract

Devido às condições de produção intensivas, os medicamentos veterinários têm sido uma importante ferramenta no controle de enfermidades, aumento de produtividade e redução de mortalidade em animais de produção. Assim, na produção de ovos também ocorre o uso intensivo destes medicamentos. Para assegurar o atendimento de requisitos de sanidade e inocuidade, a avaliação dos níveis de resíduos de medicamentos veterinários utilizados é imprescindível, bem como, o atendimento dos níveis máximos de resíduos (LMRs) estabelecidos. O controle dos níveis de resíduos, em especial dos antimicrobianos, representa importante ação de saúde pública, sendo de grande relevância nos últimos anos para o controle dos altos níveis de resistência bacteriana reportada e atribuídos ao uso indiscriminado desta classe. O objetivo do trabalho foi o desenvolvimento e validação de uma metodologia multirresíduos para o monitoramento de resíduos de medicamentos veterinários pertencentes às classes dos coccidiostáticos, quinolonas e sulfonamidas, que fosse precisa, rápida, aplicável ao processamento de um grande número de amostras de ovos e que fornecesse dados quantitativos e confirmatórios da presença destes antimicrobianos em ovos. O trabalho foi realizado em três etapas distintas. Inicialmente foi realizado o desenvolvimento do método de análise por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas em tandem (CLAE-EM/EM) para análise quantitativa confirmatória das classes em estudo. Na etapa II, otimizado o protocolo de extração, purificação e concentração dos resíduos de medicamentos veterinários pertencentes às classes de interesse, na matriz (ovos de galinhas poedeiras). Por último, o método foi validado de acordo com a Diretiva da Comissão Européia 2002/657/CE, que estabelece os critérios mínimos de desempenho para métodos de análise de resíduos de medicamentos de uso veterinário em alimentos de origem animal destinados ao consumo humano. O método desenvolvido se mostrou adequado, apresentando Limite de Quantificação (LQ) de 2,5µg.kg-1 para todos os compostos pertencentes às três classes de medicamentos veterinários (coccidiostáticos, quinolonas e sulfonamidas). Amostras coletadas em estabelecimentos de produção comercial de ovos sob supervisão do Serviço de Inspeção Federal (SIF) do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) e destinadas ao Programa Nacional de Controle de Resíduos e Contaminantes (PNCRC) puderam ser analisadas, quantificadas e a presença de resíduos confirmada através da aplicação da metodologia desenvolvida.

Due to intensive production conditions, the veterinary drugs have been an important management tool in disease control, productivity increase and mortality reduction in farm animals. Therefore, intensive use of these compounds also occurs in the egg production. To ensure compliance of health requirements and safety, the assessment of residue levels of veterinary drugs used in food-producing animals is essential, as well as the compliance with the maximum residue levels (MRLs) established. The control of residue levels, particularly of antimicrobials, is a major public health action, being of great importance in recent years for the control of bacterial resistance emergence which could be attributed to the indiscriminate use of veterinary drugs as one of the causes. The objective of this work was the development and validation of a fast and accurate high-throughput multiresidues method for monitoring residues of veterinary drugs belonging to coccidiostats, quinolones and sulfonamides classes, applicable to provide quantitative and confirmatory data of those antibiotics incidence in eggs. The study was conducted in three distinct stages. Initially was performed the development of the method using high performance liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) for quantitative and confirmatory analysis of the classes under consideration. In Step II, extraction, purification and concentration protocol of veterinary drugs residues belonging to the compounds of interest in eggs samples were optimized. Finally, the method was validated according to the European Commission Directive 2002/657/EC, which preconize minimum performance criteria of analytical methods for veterinary drugs residues determination in food. The method developed was adequate, with a limit of quantification (LQ) of 2.5 μgkg-1 for all compounds belonging to the three classes of veterinary drugs (coccidiostats, quinolones and sulfonamides). Samples were collected in commercial production establishments under supervision of the Federal Inspection Service (SIF) of the Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply (MAPA) and destined to the National Residues Control Plan (PNCRC). Positive samples could be analyzed, quantified and residues presence confirmed through the application of the developed method.