RT-PCR for detection on bovine parainfluenza virus type 3 (bPIV-3)
dc.contributor.author | Vaucher, Rodrigo de Almeida | pt_BR |
dc.contributor.author | Simonetti, Amauri Braga | pt_BR |
dc.contributor.author | Roehe, Paulo Michel | pt_BR |
dc.date.accessioned | 2010-04-16T09:16:23Z | pt_BR |
dc.date.issued | 2008 | pt_BR |
dc.identifier.issn | 1678-0345 | pt_BR |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10183/20731 | pt_BR |
dc.description.abstract | A técnica de RT-PCR tem sido freqüentemente utilizada para a detecção do vírus parainfluenza humano tipo 3 (hPIV- 3), mas a literatura é escassa em relação ao vírus parainfluenza bovino tipo 3 (bPIV-3) .O objetivo deste trabalho foi descrever uma técnica de reação em cadeia pela polimerase, precedida de transcrição reversa (RT-PCR), para a detecção do vírus parainfluenza bovino tipo 3 (bPIV-3), usando oligonucleotídeos degenerados para uma região conservada do gene da hemaglutininaneuraminidase (HN). A amostra-referência SF-4 e três diferentes isolados brasileiros de bPIV-3, além de cinco amostras virais de diferentes origens, foram incluídos neste estudo. Os vírus foram cultivados em células MDBK sob condições padronizadas. O teste de hemaglutinação (HA) foi utilizado para a titulação viral, e o teste de imunofluorescência direta (DFTA) para a triagem dos isolados. Na RT-PCR, todos os isolados de bPIV-3 mostraram amplificação de um fragmento esperado de 1009 pb do gene HN, ao contrário do que aconteceu com as amostras virais não bPIV-3, onde não foi detectada amplificação. Empregando a amostra SF-4 como controle positivo, foi obtida uma sensibilidade de 95 pg de cDNA. Apesar do pequeno número de amostras de bPIV- 3 testadas, os resultados obtidos neste estudo apontam para o uso potencial desta técnica na detecção de bPIV-3 em amostras clínicas bovinas. | pt_BR |
dc.description.abstract | The RT-PCR technique has been frequentely used for detection of the human parainfluenza virus type 3 (hPIV-3) but the literature is scarce in relation to the bovine parainfluenza virus type 3 (bPIV-3). The aim of this study was to describe a reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) for detection of bovine parainfluenza virus type 3 (bPIV-3) using degenerate oligonucleotides targeting a conserved region of hemagglutinin-neuraminidase (HN) gene. Reference strain SF-4 and three different brazilian bPIV-3 isolates, besides five viral strains from different sources, were included in this study. Viruses were cultured in MDBK cells under standard conditions. Hemagglutination (HA) test was used for viral titration and a direct immunofluorescence test (DFAT) for isolate screening. In RT-PCR all bPIV-3 isolates showed amplification of an expected 1009 bp fragment of HN gene, as oposed to non PIV-3 viral samples where no amplification was detected. Using SF-4 as positive control, sensitivity of 95 pg cDNA wasachieved. In spite of the low number of bPIV-3 isolates tested, the results obtained in this study point out the potential use of this technique for detection of bPIV-3 in bovine clinical specimens. | en |
dc.format.mimetype | application/pdf | pt_BR |
dc.language.iso | eng | pt_BR |
dc.relation.ispartof | Acta scientiae veterinariae. Porto Alegre, RS. Vol. 36, no. 3 (2008), pub. 788, p. 215-220 | pt_BR |
dc.rights | Open Access | en |
dc.subject | Bovine parainfluenza type 3 virus | en |
dc.subject | Vírus da parainfluenza 3 bovina | pt_BR |
dc.subject | BPIV-3 | en |
dc.subject | Reação em cadeia da polimerase | pt_BR |
dc.subject | Bovinos | pt_BR |
dc.subject | RT-PCR | en |
dc.subject | Hemagglutinin-neuraminidase (HN) gene | en |
dc.subject | Detection | en |
dc.title | RT-PCR for detection on bovine parainfluenza virus type 3 (bPIV-3) | pt_BR |
dc.title.alternative | RT-PCR para detecção do vírus parainfluenza bovino tipo 3 (bPIV-3) | pt |
dc.type | Artigo de periódico | pt_BR |
dc.identifier.nrb | 000683298 | pt_BR |
dc.type.origin | Nacional | pt_BR |
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