Teste rápido de suscetibilidade aos antimicrobianos pelo método de disco difusão direto do frasco de hemocultura, usando os pontos de corte estabelecidos pelo EUCAST

Abstract

O Comitê Europeu de Teste de Suscetibilidade aos Antimicrobianos (EUCAST) propôs um teste rápido de suscetibilidade antimicrobiana (RAST) por disco-difusão diretamente de frascos de hemoculturas positivas usando menor tempo de incubação e pontos de corte específicos para a interpretação dos halos de inibição. O objetivo deste estudo foi avaliar essa técnica após 4 e 6 h de incubação para isolados clínicos de Enterobacteriaceae usando os pontos de corte ‘‘RAST breakpoints” estabelecidos pelo EUCAST. Um total de 61 isolados de Escherichia coli e Klebsiella spp. oriundos de frascos de hemocultura (BacT/Alert FA Plus) incubadas no sistema BacT/Alert foram avaliados. Os resultados foram interpretados usando os pontos de corte RAST (4-6 h), bem como os pontos de corte convencionais do EUCAST. Foram avaliados os resultados de concordância categórica (CA), erros menores (mE), erros maiores (EM) e erros muito maiores (VME). O índice de PABAK foi utilizado para avaliar a correlação entre a leitura rápida e a leitura convencional. Embora tenha sido possível observar a formação de halos de inibição de E.coli e Klebsiella spp. após 4 h de incubação, uma observação mais nítida só foi possível após 6 h de incubação. O RAST em 6 h apresentou melhores resultados de concordância e erros categóricos (CA = 94,4%, mE = 4,3%, EM = 0,8% e VME = 0,4%) comparado ao RAST em 4 h (CA = 84,3%, mE = 13,0%, ME = 3,2% e VME = 0,4%). Em 4h, usando pontos de corte convencionais, renderam uma CA, mE e ME de 43,3%, 34,6% e 22,2%, respectivamente. As leituras em 6h, utilizando pontos de corte de referência, indicaram CA, mE e ME de 54,9%, 36,9% e 8,1%, respectivamente. Não foi observado VME em ambos os horários. A interpretação da leitura rápida (4 h ou 6 h) feita com os pontos de corte convencionais apresentaram resultados insatisfatórios. Esses dados indicam que as leituras em 6 h, usando os pontos de corte proposto pelo EUCAST (RAST breakpoints) para todos os antibióticos testados neste estudo (com exceção da amicacina), podem ser usadas no laboratório de microbiologia clínica para antecipar os resultados do TSA das hemoculturas. As leituras realizadas em 4h (RAST breakpoints) também podem ser usadas, mas não para todos os antibióticos.

The European committee on antimicrobial susceptibility testing (EUCAST) has proposed a rapid antimicrobial susceptibility test (RAST) by disk diffusion test directly from positive blood culture bottles using specific breakpoints interpretation for a short incubation time. The aim of this study was to evaluate the disk diffusion technique after 4 and 6 h directly from positive blood culture bottles of Enterobacteriaceae using the RAST breakpoints established by EUCAST. A total of 61 isolates of Escherichia coli and Klebsiella spp. were selected after the blood culture bottles (containing BacT/Alert FA Plus) flagged positive. The results were assessed using the RAST breakpoints (4–6 h) as well as the standard breakpoints (18 h) from EUCAST. Results of categorical agreement (CA), minor errors (mE), major errors (ME) and very major errors (VME) were evaluated. The PABAK index was used to evaluate the correlation between early and standard readings. The vast majority of the zone diameters of E. coli and Klebsiella spp. were optimally readable after 6 h of incubation. RAST in 6 h presented best results of categorical concordance and errors (CA = 94.4%, mE = 4.3%, ME = 0.8%, and VME = 0.4%) compared to RAST in 4 h (CA = 84.3%, mE = 13.0%, ME = 3.2%, and VME = 0.4%). Readings at 4h using reference breakpoints rendered CA, mE, and ME of 43.3%, 34.6%, and 22.2%, respectively. No VME were observed. Readings at 6h using reference breakpoints indicated CA, mE, and ME of 54.9%, 36.9%, and 8.1%, respectively. No VME were observed. The interpretation of rapid readings (4–6 h) with the conventional breakpoints presented unsatisfactory results. These data indicate that the early readings in 6 h using the RAST breakpoints for all antibiotics tested in this study (except amikacin) may be used in the clinical microbiology laboratory to anticipate the AST results of blood cultures. Early readings at 4 h (RAST breakpoints) may also be used, but not for all antibiotics.