Proposta de reação em cadeia da polimerase (PCCR) semi-nested para pesquisa e diferenciação dos vírus BK e JC

Abstract

Objetivos: Implantar e otimizar a reação em cadeia da polimerase (PCR) semi-nested para pesquisa e diferenciação dos vírus BK e JC a partir de amostras clínicas armazenadas. Métodos: Foram testadas 9 amostras clínicas (urina e líquor). As amostras foram submetidas à PCR semi-nested, e foram testadas também com diferentes condições, visando a otimização da reação. Resultados: Primeiramente os controles positivos foram testados quanto à especificidade através de uma PCR direta, e os resultados obtidos confirmaram a especificidade. Quando testadas por PCR semi-nested, as amostras apresentaram os seguintes resultados: 100% (nove amostras) positivas para o vírus BK e 66,6% (seis amostras) positivas para o vírus JC. Conclusões: Otimizou-se a reação de PCR seminested, específica para a identificação dos poliomavírus, para assim atuar como uma ferramenta diagnóstica para melhor acompanhamento de pacientes imunocomprometidos.

Aims: To implant and optimize the semi-nested polimerase chain reaction (PCR) to identify and differentiate BK and JC virus. Methods: Nine clinical (urine and liquor) samples have been tested with semi-nested PCR. In order to optimize this reaction, different conditions have been tested. Results: Specificity has been confirmed by using JC and BK positive controls. When tested with semi-nested PCR, the clinical samples showed the following results: 100% (nine samples) positive from BK virus, and 66.6% (six samples) positive from JC virus. Conclusions: The semi-nested PCR reaction, specific for identification of polyomavirus, was optimized for acting as a tool for better follow-up of immunocompromised patients.