Expressão de membros da superfamília TGF-β, seus receptores e sinalizadores intracelulares em células da granulosa de folículos antrais de mulheres inférteis com endometriose

Abstract

Base teórica O desenvolvimento oocitário depende da comunicação bi-direcional entre o oócito e as células da granulosa e da teca; e os membros da superfamília TGF-β são responsáveis por essa comunicação, desempenhando importante papel nos processos de foliculogênese e oogênese. A endometriose é uma doença que causa infertilidade e já foi determinado que o AMH, membro da superfamília TGF-β, apresenta genótipo polimórfico nesse grupo de pacientes, além de estar estabelecido na literatura que há comprometimento das células da granulosa nessa doença. Objetivo Determinar a expressão gênica dos ligantes (AMH, BMP-6, GDF-9, INHA, INHBB e TGFβ3), receptores (AMHR2, BMPR2 e TGFβR3) e sinalizadores intracelulares (SMAD3 e SMAD4) em células da granulosa de folículos antrais de mulheres inférteis com endometriose. Métodos Estudo caso-controle em que se avaliou a expressão de membros da superfamília TGF-β em mulheres inférteis com endometriose comparando-as com mulheres submetidas à fertilização in vitro por infertilidade tubária ou masculina através de PCR em tempo real com sondas TaqMan. Resultados Os dados dos ciclos de reprodução assistida e a idade não apresentaram diferença estatística entre os grupos estudados. A análise de expressão dos genes demonstrou que o ligante BMP-6, com Quantificação Relativa de 0,431 (QR: 0,355-0,524) (P=0,013) e o sinalizador intracelular SMAD4, com Quantificação Relativa de 0,624 (QR: 0,529-0,735) (P=0,044) apresentam níveis diminuídos nas pacientes inférteis com endometriose em comparação com o grupo controle. Os demais genes não apresentaram diferença significativa entre os grupos. Conclusão O grupo de pacientes inférteis com endometriose apresentou expressão de BMP-6 e SMAD4 reduzidas, indicando que o desenvolvimento oocitário é deficiente nestas pacientes no que compete às funções da BMP-6 e que deve haver comprometimento de todas as rotas sinalizadas pelo SMAD4.

Base theory Oocyte development depends on the bi-directional communication between the oocyte and the granulosa and theca cells, and the members of the TGF-β superfamily are responsible for this communication, playing an important role in folliculogenesis and oogenesis. Endometriosis is a disease that causes infertility, and it has been determined that anti-Müllerian hormone (AMH), a member of the TGF-β superfamily, shows genetic polymorphism in this group of patients, besides being established in the literature that granulosa cells are involved in this disease. Objective The aim of this study was to determine gene expression of the ligands AMH, BMP-6, GDF-9, INHA, INHBB and TGFβ3, receptors AMHR2, BMPR2 and TGFβR3, and intracellular signal transducers SMAD3 and SMAD4 in antral follicle granulosa cells from infertile women with endometriosis. Methods A case-control study was conducted to evaluate the expression of TGF-β superfamily members in infertile women with endometriosis, comparing them with women undergoing in vitro fertilization due tubal or male infertility through real-time PCR with TaqMan probes. Results The data of assisted reproduction cycles and age did not show statistical difference between the groups studied. Expression analysis of the genes demonstrated that the ligand BMP-6 with Relative Quantification of 0.431 (RQ=0.355-0.524) (P=0.013) and the signal transducer SMAD4 with Relative Quantification of 0.624 (RQ=0.529-0.735) (P=0.044), indicating decreased expression levels in patients with endometriosis compared to the control group. The other genes did not exhibit significant differences between the groups. Conclusion The group of patients with endometriosis had reduced expression of BMP-6 and SMAD4, indicating that oocyte development is deficient in these patients, with regard to BMP-6 functions, and that all SMAD4 signaling pathways should be impaired.