Comparision of lipolytic activity of Sporothrix schenckii strains utilizing olive oil-rhodamine B and Tween 80

Abstract

The aim of this work was to identify the lipase activity of Sporothrix schenckii strains using Rhodamine B as an indicator of triglyceride hydrolysis (triolein from olive oil) and to compare these results with the use of Tween 80 as substrate. Free fatty acids released from lipase activity were detected on agar plate complexed with Rhodamine B, when exposed to UVA light, through orange fluorescence and by precipitation haloes on Tween 80 agar. There were differences in lipolytic activity among strains and between the media utilized. The highest lipase activity (orange fluorescence) was observed on the biomass of 10 strains, with no fluorescent haloes around the colonies, whereas only six strains showed large precipitation haloes. These plate assays are suitable for the detection of lipase-producing strains of S. schenckii in the yeast phase, but it is still unknown whether different enzymes act upon the substrates or whether there are variations of the same enzyme with different specificities.

O objetivo deste trabalho foi identificar a atividade lipolítica de cepas de Sporothrix schenckii utilizando Rodamina B como indicador da hidrólise de triglicerídios (trioleína do óleo de oliva) e comparar estes resultados com a utilização de Tween 80 como substrato. Ácidos graxos livres liberados da atividade lipolítica foram detectados através da emissão de fluorescência laranja em ágar, quando exposto à luz UVA, ou através de halos de precipitação em ágar Tween 80. Não houve diferenças na atividade lipolítica entre as cepas bem como meios de cultivo utilizados. A maior atividade lipolítica (fluorescência laranja) foi observada na biomassa de 10 cepas, sem halos fluorescents ao redor das colônias, enquanto apenas seis isolados apresentaram grandes halos de precipitação. Esses ensaios em placa são úteis para a detecção de S. schenckii produtores de lipase na fase leveduriforme, mas ainda se desconhece se são diferentes enzimas atuando sobre os substratos ou se são variações da mesma enzima com diferentes especificidades.