Avaliação do perfil fenotípico de células natural killer (NK) e expressão de antígeno leucocitário humano G solúvel (SHLA-G) na medula óssea de pacientes com leucemia mieloide aguda ao diagnóstico

Abstract

As células Natural Killer (NK) são células efetoras imunes inatas envolvidas, principalmente, na vigilância imunológica e eliminação espontânea, sem necessidade de sensibilização prévia de células malignamente transformadas que exibem receptores de estresse ou baixa expressão do complexo principal de histocompatibilidade (MHC) de classe I. Diversos estudos clínicos exploram a expressão de receptores e a atividade citotóxica de células NK em malignidades hematológicas, visando estabelecer o potencial citotóxico destas células e maximizar a elucidação de seus mecanismos de ativação e inibição em ambientes imunossupressores. Descobertas recentes na biologia molecular e celular das células NK apontam diferentes receptores de superfície relacionados a ligantes imunossupressores, dentre os quais destaca-se o Antígeno Leucocitário Humano G solúvel (sHLA-G), uma molécula de MHC classe I não clássica cuja atividade supressora de células efetoras imunitárias é exercida devido a interações com receptores ILT2, ILT4 e KIR2DL4. Estes receptores são expressos principalmente em células NK, linfócitos T CD8+ e monócitos. O sHLA-G desempenha um papel importante no desenvolvimento de tolerância em transplantes de órgãos e medula óssea, estando também envolvido na modulação da resposta imune durante a carcinogênese. Neste contexto, esse estudo teve como objetivo avaliar o nível de sHLA-G na medula óssea (MO) de pacientes ao diagnóstico de Leucemia Mieloide Aguda (LMA), estabelecer o perfil de expressão fenotípica das células NK com ênfase em receptores para sHLA-G e estudar aspectos relacionados à imunomodulação a partir da dosagem de citocinas. Os resultados mostraram uma frequência significativamente menor de células NK na medula óssea dos pacientes com LMA em comparação com doadores saudáveis (4,25% vs 7,18%, p <0,001). Quando comparada a MO normal com a medula de pacientes com LMA, nesta última houve uma maior frequência de células NK CD56dim CD16+ (90,47% vs 78,71%, p = 0,007), menor frequência dos subconjuntos de células NK CD56dim CD16- (7,51% vs 17,24%, p <0,010) e células NK CD56Bright (2,00% vs 4,93%, p <0,014). Quanto aos níveis de IL-6, IL10 e TNF-α, na MO dos pacientes com LMA, estes foram significativamente maiores em comparação com doadores saudáveis. Tal conhecimento permite estabelecer e identificar processos biológicos relevantes para a patogênese da LMA de acordo com a influência sobre o potencial citotóxico de células NK. A caracterização molecular do microambiente permissivo ao desenvolvimento da LMA pode contribuir para a construção de moléculas modificadoras deste ambiente tornando-o adverso ao desenvolvimento da neoplasia.

Natural Killer (NK) cells are innate immune effector cells mainly involved in immunesurveillance and spontaneous elimination of malignantly transformed cells exhibiting low expression of the major histocompatibility complex (MHC) Class I, without prior sensitization. Several clinical studies explore the expression of receptors and the cytotoxic activity of NK cells in hematologic malignancies, to establish the cytotoxic potential of these cells and maximize the elucidation of their mechanisms of activation and inhibition in immunosuppressive environments. Recent discoveries in the molecular and cellular biology of NK cells point to different surface receptors related to immunosuppressive ligands, such as soluble human leukocyte antigen G (sHLA-G), a non-classic MHC class I molecule with suppressive activity immune effector cells and exerted due to interactions with ILT2, ILT4 and KIR2DL4 receptors. These receptors are expressed primarily in NK cells, CD8+ T lymphocytes and monocytes. sHLA-G plays an important role in the development of tolerance in organ and bone marrow transplants and is also involved in the modulation of the immune response during carcinogenesis. In this context, this study aimed to evaluate the level of sHLA-G in the bone marrow (BM) of patients at diagnosis of acute myeloid leukemia (AML), to establish the NK cells phenotypic expression profile of NK cells with emphasis on sHLA-G receptors, and to study aspects related to immunomodulation from the cytokine dosage. The results showed a significantly lower frequency of NK cells in the bone marrow (BM) of AML patients when compared to the healthy bone marrow donors (4.25% vs.7.18%, p < 0.001). When comparing the normal BM with AML BM, in the latter there was a higher frequency of CD56dim CD16+ NK cells (90.47% vs. 78.71%, p = 0.007); lower frequency of CD56dim CD16- NK cells (7.51% vs. 17.24%, p < 0.010) and CD56Bright NK cells subsets (2.00% vs. 4.93%, = 10, p < 0.014). As for IL-6, IL10 and TNF-α levels, in AML BM, they increased significantly compared with healthy donnors. Such knowledge allows to establish and identify relevant biological processes to the pathogenesis of AML according to the influence on the cytotoxic potential of NK cells. The molecular characterization of the permissive microenvironment to the development of AML may contribute to the construction of modifying molecules of this environment, making it adverse to the development of neoplasia.