Classificação da subespécie e do biovar de isolados de Pasteurella Multocida de origem aviária através de testes bioquímicos e pesquisa da presença do gene exBD-tonB

Abstract

Pasteurella multocida é um bactéria gram-negativa causadora de diversas doenças de importância econômica, incluindo-se rinite atrófica em suíno, septicemia hemorrágica em ungulados, doenças respiratórias em coelhos e cólera aviária (CA) em aves. A CA deve ser considerada como diagnóstico diferencial de doenças de notificação obrigatória que cursam com morte súbita A caracterização fenotípica é uma ferramenta de diagnóstico demorada e pouco empregada, mas que apresenta grande importância para obtenção de dados epidemiológicos e melhor conhecimento das propriedades do patógeno estudado. Os objetivos deste estudo foram a identificação, através de testes bioquímicos, da subespécie e do biovar a que pertencem 59 estirpes de P. multocida isolados de casos clínicos de CA, além da detecção do gene Exbd-tonB, envolvido no mecanismo de aquisição de ferro, através de PCR. A maioria dos isolados analisados pertence à subsp. multocida (52), destes 21 cepas pertencem ao biovar 3, o qual foi o mais frequente, cinco ao biovar 1, quatro ao biovar 2, oito ao biovar 9 e 14 cepas ao biovar 13. A subespécie septica foi identificada em seis isolados, que foram classificados nos biovares 5, 7 e 10. Apenas um isolado foi identificado na subespécie gallicida e este pertence ao biovar 8. O gene exBD-tonB foi amplificado em 100% das cepas do estudo. A alta frequência do gene exBD-tonB observada no estudo e em trabalhos anteriores sugere que este gene pode ser usado em protocolos de PCR para o diagnóstico molecular em casos suspeitos de CA.

Pasteurella multocida is a gram-negative bacteria causative of various diseases that are of significant economic importance incluiding artrohic rhinitis in swine, hemorrhagic septicemia in ungulates, respiratory diseases in rabbits and fowl cholera (FC) in bird. The FC should be considered in the differential diagnosis in notifiable diseases that presente whit sudden death. Phenotypic chacterization is a time consuming diagnosis and rarely used, but it has great importance for obtaining epidemiological information and better knowlegde of the properties of the target pathogen. The objectives of this study were identify, though biochemical test, the subspecies and biovars that 59 strains of P. multocida isolated from clinical cases of FC belong, beside the detection of the gene exBD-tonB, involved in the iron uptake mechanisms, through PCR. Fifty two of the isolates belong to P. multocida ssp. multocida, of these 21 were biovar 3, wich was the most frequent. The other biovas that were identify and belong to subspecie multocida were biovar 1 with five isolates, biovar 2 with four isolates, biovar 9 with eigth isolates and biovar 13 with 14 isolates. The subspecie septica had six strains that belong to biovar 5, 7 e 10. The subspecie gallicida had only one isolate that belong to the biovar 8. The exBD-tonB gene was amplified in 100% of strains of the study. The high frequence of exBD-tonB gene observed in the study and in previous studies suggest that this gene can be used in PCR protocols for molecular diagnosis in suspected cases of FC.