Modelo de esferoide tumoral : uma abordagem tridimensional para triagem de drogas in vitro

Abstract

O diagnóstico tardio do câncer oral está relacionado a altas taxas de mortalidade e, para aumentar as chances de cura com o tratamento quimioterápico, há uma grande área de pesquisa focada no desenvolvimento de drogas antitumorais. Porém, a maioria dos experimentos in vitro são realizados em cultura celular bidimensional, o que geralmente é seguido de ineficácia quando testados na etapa in vivo. A cultura celular tridimensional de ensaio de esferoides está sendo amplamente utilizada para testar potenciais substâncias antitumorais, pois essa metodologia mimetiza melhor o microambiente tumoral in vivo e, portanto, produz resultados mais confiáveis que a tradicional cultura celular bidimensional. No nosso estudo, o objetivo foi avaliar a capacidade de diferentes linhagens celulares em formar esferoides – fibroblastos, queratinócitos, células endoteliais e linhagens tumorais de carcinoma espinocelular oral – através da metodologia de esferoides e analisar os efeitos desencadeados pelo tratamento com cisplatina, o quimioterápico padrão-ouro para tratamento desse câncer. Foi observado que todas linhagens celulares testadas foram capazes de formar esferoides tridimensionais - apesar de apresentarem diferentes comportamentos - e quando tratados com cisplatina, esses esferoides demonstraram efeitos relacionados à coesão celular vistos como um espalhamento das células.

The late diagnosis of oral cancer is related to high mortality rates and, to increase the chances of cure with chemotherapy, there is a large research area focused on antitumoral drugs development. However, most assays are performed in bidimensional conditions often followed by failure on treatment effectiveness when performed in vivo. Tridimensional cell culture has been widely used to test potential antitumoral substances for cancer treatment because it mimics better the in vivo microenvironment and, therefore, it is more reliable than traditional single layer culture. In this study we evaluated the capacity of different cells to form tridimensional spheroids – fibroblasts, keratinocytes, endothelial cells and oral squamous cell carcinoma (OSCC) cell lines – through spheroid assay and analyzed cisplatin treatment effects on spheroids. It was observed that all cell lines tested were capable of form tridimensional spheroids – although they showed different behaviors – and when treated with cisplatin, the spheroids demonstrated effects related to cell-cell cohesion, seen as a spheroid spreading.