Avaliação do potencial mutagênico do mesilato de doxazosina na linhagem celular de glioma de rato (C6), através da técnica de micronúcleo com bloqueio da citocinese celular (CBMN)

Abstract

O mesilato de doxazosina é utilizado na clínica para o tratamento de hipertensão, insuficiência cardíaca congestiva e hiperplasia benigna de próstata (BPH). Porém, muitos estudos demonstram seu potencial antineoplásico, principalmente para tratamento de glioblastomas. O teste de CBMN (Cytokynesis-block micronucleus ) é extensivamente utilizado na epidemiologia celular e citogenética para determinar a presença e a extensão de dano cromossômico. Este teste detecta agentes genotóxicos clastogênicos e aneugênicos através da análise de alterações gênicas como micronúcleos (MN), pontes nucleoplasmáticas (PN) e brotos nucleares (BrN). Considerando que poucos trabalhos relatam a capacidade genotóxica da doxazosina e visando suas novas aplicações terapêuticas, se torna importante que haja uma avaliação do seu potencial mutagênico. Portanto, o objetivo do nosso estudo foi avaliar o potencial citotóxico e mutagênico do mesilato de doxazosina, através da técnica de CBMN in vitro , na linhagem de glioma de rato (C6). Para isso as células foram submetidas ao tratamento com mesilato de doxazosina em concentrações de 3μM a 250μM em conjunto com citocalasina (2,5 μl/mL), um bloqueador da citocinese celular, durante um período de 24 horas. Após isso, foi realizada a coleta das células em lâminas através do uso de citocentrífuga e posterior coloração. Essas lâminas foram analisadas em microscópio óptico, onde, pelo menos mil células por cultura foram analisadas quanto a presença de células mono, bi, tri e multinucleadas para análise do CBPI ( Cytokinesis-Block Proliferation Índex ), e duas mil células por cultura foram analisadas quanto a frequência de MN, PN e BrN, para todas as concentrações. Na análise do CBPI encontramos resultados significativos para ambos os testes nas células tratadas com doxazosina nas concentrações acima de 50μM. Para análises de marcadores de instabilidade genômica, notamos uma significativa diminuição no número de micronúcleos das células tratadas com as concentrações de 3μM, 6μM e 12μM de doxazosina, se comparados às células do controle negativo. Sendo assim, concluímos que a doxazosina é capaz de induzir citostase de 50% em células C6 quando aplicada na concentrações de 100μM e 150μM quando analisadas pelo CBPI. Nas concentrações de mesilato de doxazosina testadas no presente estudo (3μM a 50μM) em célula de glioma de ratos (C6) pelo teste de CBMN, não há evidências significativas de que esse fármaco apresente potencial mutagênico.