Influência do tempo de incubação a 37ºc de doses de sêmen resfriadas e diluídas em dois diferentes diluentes na análise de motilidade espermática no sistema casa

Abstract

O uso do sistema CASA (Computer-Assisted Sperm Analysis) teve um grande crescimento, tanto nos laboratórios comerciais de produção de sêmen quanto em trabalhos de pesquisa que investigam a influência dos diversos parâmetros de motilidades oferecidos pelo sistema. Entretanto, muitos aspectos precisam ser padronizados para uma correta avaliação. O presente estudo foi realizado com o objetivo de avaliar a influência do tempo de incubação de amostras seminais a uma temperatura de 37ºC antes da análise motilidade espermática no sistema CASA. Foram utilizados 4 ejaculados de 5 machos suínos sexualmente maduros. Os ejaculados foram diluídos para a produção de doses em split sample em dois diluentes: curta duração (BTS) e em longa duração (Androstar® Plus). As doses foram armazenadas a 17,3± 0,5°C por 72 horas e avaliadas de acordo com o tempo de incubação a 37ºC (10, 20 e 30 minutos) e idade da dose (24 e 72 horas após a diluição). O diluente de longa duração teve resultado superior durante o período de armazenamento. Com relação à idade das doses, as amostras analisadas com 24h tiveram desempenho superior às doses com 72h de armazenamento. Não houve diferença estatística em relação ao tempo de incubação para as variáveis motilidade total, motilidade progressiva, motilidade local, DSL, VSL, raio e rotação. Entretanto, ao se avaliar parâmetros de motilidade como: motilidade rápida, motilidade lenta, motilidade circular, DCL, DAP, VCL, VAP, BCF, STR, LIN e WOB, o tempo de incubação 10 minutos teve um desempenho superior aos demais. Desta forma, apesar dos parâmetros de motilidade total e progressiva não terem sido influenciados pelo tratamento, o tempo de incubação ideal para que as avaliações de motilidade sejam realizadas no sistema CASA é ao redor de 10 minutos, já que após esse intervalo algumas características de motilidade foram prejudicadas.

Using CASA system (Computer-Assisted Sperm Analysis) has greatly increased in both commercial laboratories of semen production and in research studies that investigate the influence of several parameters of motility from the system. However, many aspects should be standardized for proper evaluation. This study was conducted in order to evaluate the effect of incubation time under 37°C before sperm motility analysis using CASA system. Four ejaculates from 5 sexually mature boars were used. The samples were diluted in split sample into two extenders: short (BTS) and long term (Androstar® Plus). The insemination doses were stored at 17,3±0,5°C and evaluated according to the incubation time at 37°C (10, 20 and 30 minutes) and age of the dose (24 and 72 hours after dilution). The long term diluent had a better result during the storage period. Regarding the age of the dose, the samples with 24 hours of storage had superior performance than the doses of 72 hours of storage. There was no statistical difference in relation to the incubation time for the variables Total Motility, Progressive Motility, Local Motility, DSL, VSL, Radius and Rotation. However, some motility parameters, such as rapid motility, slow motility, circular motility, DCL, DAP, VCL, VAP, BCF, STR, LIN and WOB, in 10 minute treatment outperformed others. Thus, even though the total and progressive motility parameters were not influenced by the time of incubation, the ideal incubation time for the motility evaluations conducted with CASA system is around 10 minutes, since after this interval certain motility characteristics were negatively affected.