Avaliação da proliferação e da imortalização celulares no epitélio lingual de ratos submetidos ao modelo de carcinogênese induzida pela 4-nitroquinolina 1-óxido (4NQO)

Abstract

O objetivo deste estudo foi avaliar proliferação e imortalização celulares no epitélio lingual de ratos submetidos ao modelo de carcinogênese bucal induzida pela 4NQO. Foram utilizados 43 ratos Wistar machos distribuídos em dois grupos experimentais: controle (n=10) e 4NQO (n=33). Os animais do grupo controle receberam ração padrão e água ad libitum e foram submetidos à eutanásia após 20 semanas de experimento. Os animais do grupo 4NQO receberam ração padrão e o carcinógeno diluído em água (25 ppm) e foram submetidos à eutanásia após 4 (T4, n=10), 12 (T12, n=10) ou 20 (T20, n=13) semanas de experimento. Posteriormente, as línguas dos animais foram removidas para avaliação clínica e histopatológica da mucosa. Clinicamente, as lesões foram classificadas em mancha/placa, nódulos e úlceras. Houve uma maior incidência de lesões nos animais do grupo T20. Microscopicamente, as amostras foram classificadas em: sem alteração histopatológica, hiperplasia epitelial (com hiperceratose), displasia epitelial (leve, moderada, severa), carcinoma in situ (CIS) e carcinoma espinocelular (CEC). A avaliação da imunomarcação com BMI-1 foi semiquantitativa a partir da utilização de um sistema de escores (0-30%, 30-50%, 50-80% e >80%). A quantificação da imunomarcação pelo Ki-67 considerou o número de células positivas para 1000 células epiteliais. Foram encontradas 65 lesões a partir da análise histopatológica, sendo as primeiras percebidas no grupo T4. As imunomarcações pelo Ki-67 e pelo BMI-1 foram progressivamente maiores à medida que as alterações histopatológicas se tornavam mais graves, mas o aumento da imunomarcação pelo BMI-1 só aumentou significativamente no grupo composto por CIS/CEC. Houve associação entre as imunomarcações por Ki-67 e por BMI-1 (Correlação de Spearman, R=0,33, p=0,03). Os resultados deste estudo indicam que proliferação e imortalização celulares são eventos relacionados e que a proliferação celular aumenta gradualmente e a imortalização celular aumenta no estágio mais avançado da progressão tumoral.

The aim of this study was to evaluate cell proliferation and immortalization in the lingual epithelium of rats submitted to the oral carcinogenesis model induced by 4-Nitroquinoline 1-oxide (4NQO). 43 Male Wistar rats were distributed into two groups: control (n = 10), 4NQO (n = 33). The animals in the control group received standard chow diet and water ad libitum and were euthanized after 20 weeks of experiment. The animals of 4NQO group received standard rat chow diet and the carcinogen diluted in water (25 ppm) and were euthanized after 4 (T4, n=10), 12 (T12, n=10) or 20 (T20, n=13) weeks of the experiment. Subsequently, the tongues of the animals were removed to clinical and histopathological evaluation of the mucosa. Clinically, the lesions were classified into patch/plaque, nodules and ulcers. There was a higher incidence of lesions in animals of Group T20. Microscopically, the samples were classified as no histopathological changes, epithelial hyperplasia (with hyperkeratosis), epithelial dysplasia (mild, moderate, severe), in situ carcinoma (ISC) and squamous cell carcinoma (SCC). The evaluation of immunostained with BMI-1 was taken from the system scores (0-30%, 30-50%, 50-80% and > 80%). The quantification of Ki-67 immunolabeling considered the number of positive cells for 1000 epithelial cells. 65 lesions were found from the histopathological analysis, and firstly noticed in the T4 group. Positivity for Ki-67 and BMI-1 increased progressively over the histopathological chances stages. However the BMI-1 immunolabeling increase was statistically significant only for ISC/SCC stage. There was an association between immunostaining for Ki-67 and BMI-1 (Correlação de Spearman, R=0,33, p=0,03). The results of this study indicate that cell proliferation and immortalization are related events and that gradually increases cell proliferation and cell immortalization increases the more advanced stages of tumor progression.