Comparação dos fatores de virulência e resistência a antimicrobianos de amostras de Escherichia (e.) coli isoladas de fezes de leitões de creche com diarreia e E. coli isoladas da água das mesmas granjas

Abstract

Atualmente, um dos problemas mais observados na suinocultura são as diarreias que acometem leitões na fase de creche, levando a prejuízos na cadeia produtiva em função da perda de peso dos animais, desidratação e gastos com medicamentos. Escherichia (E.) coli, causadora da colibacilose na fase de maternidade e após do desmame, é um dos principais agentes infecciosos envolvidos nas diarreias pós desmame, podendo determinar índices de mortalidade de até 25%. A diarreia ocorre entre a primeira e a terceira semana após a entrada nas creches e apresenta-se de forma pastosa a líquida, de coloração amarelada ou acinzentada. E. coli é uma bactéria comensal do intestino dos leitões e sua patogenicidade está diretamente relacionada com a expressão de fímbrias e toxinas. A via fecal-oral é a principal via de transmissão, sendo a água uma importante fonte de contaminação, podendo ocasionar as diarreias. Visando observar a possibilidade de transmissão de E. coli enterotoxigênica (ETEC) via água, o objetivo do trabalho foi isolar e tipificar E. coli de amostras de água provenientes de caixas d’água e bebedouros de creches de suínos e de suabes retais de leitões com diarreia pós desmame. Em amostras com isolamento de E. coli foi realizado PCR multiplex para a detecção das fímbrias e toxinas presentes nas amostras e realizado o antibiograma, sendo possível comparar os fatores de virulência e resistência antimicrobiana em amostras isoladas da água e naquelas isoladas dos leitões. Em quatro das dez amostras de água foi possível isolar E. coli, entretanto, nenhuma apresentava os genes para os fatores de virulência característicos de cepas ETEC. Das 60 amostras de suabes retais analisadas, 21 isolaram E. coli e sete encontraram fatores de virulência para ETEC. Os fatores de virulência mais frequentes foram as fímbrias F18 (62,5%) e F4 (25%) e as toxinas STb (100%) e STap (75%). E. coli isoladas das amostras de água apresentaram maior resistência aos antimicrobianos apramicina, florfenicol, lincomicina, lincomicina+espectinomicina, oxitetraciclina e sulfametoxazol+trimetoprim e foram sensíveis a colistina e fosfomicina. As sete ETEC isoladas de suabe retal apresentaram maior resistência à lincomicina e menor resistência à fosfomicina. As 14 E. coli não ETEC isoladas de suabe retal apresentaram maior resistência ao florfenicol e não apresentaram resistência a colistina. E. coli enterotoxigênica é um importante agente na causa de colibacilose pós-desmame, porém não parece ser capaz de desenvolver fatores da virulência na água, possivelmente por depender de condições do animal para isso. Os resultados mostraram que a água não é uma importante fonte de transmissão de ETEC. As amostras analisadas apresentaram uma ampla variação nos fatores de resistência a dez antimicrobianos diferentes, apresentando inclusive multirresistência.

One of the most frequent problems in the swine industry is diarrhea in nursery pigs, which causes significant losses due to weight loss, dehydration and cost of medication. Escherichia (E.) coli is one of the main agents of the post-weaning diarrhea and can cause a disease with mortality rate as high as 25%. The diarrhea occurs between the first and third week post-weaning and varies in consistency from very watery to pasty with a colour range from grey to yellow. E. coli is an intestinal commensal bacteria in pigs and its pathogenicity is directly related to fimbria and toxins gene expression. Fecal-oral is the mainly route of transmission, and water is an important contamination source. To investigate the possibility of enterotoxigenic E. coli (ETEC) transmission through water, the objective of this study was to isolate and to typify E. coli from pig nursery water samples and from nursery pig´s rectal swabs presenting post-weaning diarrhea. After isolation of E. coli, positive samples were genotyped by Multiplex PCR - to determine specific fimbria and toxin genes present in the isolate - followed by antibiogram analysis. Virulence factors and antimicrobial resistance could then be compared between water and piglet samples. E. coli was isolated in four out of the ten water samples, although none of them expressed ETEC virulence factors. From 60 rectal swab samples, 21 E. coli were isolated and seven expressed ETEC virulence factors. The fimbria presenting higher frequency was F18 (62,5%) and F4 (25%) and the toxins were STb (100%) and STap (75%). E. coli isolated from water samples presented higher resistance to apramycin, florfenicol, lincomicin, lincomicin+spectinomycin, oxytetracycline and sulfametoxazol+trimethoprim and did not present resistance to colistin and fosfomicin. The seven ETEC from rectal swab samples presented a higher resistance factor to lincomicin, and lower resistance factor to fosfomicin. The 14 non ETEC from rectal swab samples presented a higher resistance factor to florfenicol e no resistance to colistin. E. coli enterotoxigenic is an important agent causing post-weaning diarrhea, even though it seems incapable to develop its virulence factors in the water, probably because it may depends on conditions present exclusively in the animal organism. The results show that contamination of drinking water with ETEC was not an important cause of infection of the nursery piglets in the experiment. The samples analysed presented a wide range of resistance to the different antimicrobials, including multi-resistance.