Avaliação quantitativa de vegf a por qrt-pcr em fígados de pacientes com atresia biliar

Abstract

A Atresia Biliar, principal causa de transplante hepático em crianças, tem causa obscura. Para avaliar a presença de uma arteriopatia como causa da doença investigamos a expressão do vascular endothelial growth factor A (VEGF A) em fígados de pacientes afetados. Amostras de fígados de pacientes com Atresia Biliar (n=21) e controles com outras causas de colestase neonatal (n=6) foram analisadas por qRT-PCR para quantificar a expressão do VEGF A. As amostras foram marcadas por imunoistoquímica com anti-CK7 e analisadas por morfometria quanto à percentagem de citoqueratina 7(PCK7), que define a extensão da proliferação biliar. Não houve diferença da expressão do VEGF A entre o grupo com Atresia Biliar e os controles (P=0,199). Não houve diferença na expressão do VEGF A em pacientes com Atresia biliar com mais ou menos 60 (P=0,881),70 (P=0,128) ou 90 dias (P=0,801) de vida no momento da Portoenterostomia. Os pacientes com PCK7 maior que 10,18% tiveram um menor valor de expressão de VEGF A quando comparados com os pacientes com um PCK7 menor que este valor (P=0,044). A variável que distinguiu os subgrupos de Atresia biliar não foi a idade por ocasião da Portoenterostomia, mas sim a extensão da proliferação biliar. A diminuição da expressão do VEGF A em fígados diminui em quadros de obstrução mecânica ao fluxo biliar e obstrução ao fluxo arterial associados. Nossos dados sugerem que na AB, haja um componente isquêmico atuando nas estruturas biliares, que se torna evidente nos pacientes com maior extensão da proliferação biliar.

Biliary atresia, the main indication for pediatric liver transplantation, has an elusive etiology. We investigated the expression of VEGF A in order to evaluate the putative role of an arteriopathy as an etiologic factor in Biliary Atresia. Tissue samples from patients with biliary atresia (n=21) and controls with other causes of neonatal cholestasis (n=6) were analyzed through qRT-PCR to assess VEGF A expression. They were also stained with anti-CK7 by immunohistochemistry to evaluate through morphometry the percentage of CK7 (PCK7), which indicates the extent of biliary proliferation. Our results showed no difference between VEGF A expression between patients with biliary Atresia and controls (P=0,199); no differences in VEGF A expression between patients with biliary atresia with age groups higher and lower than 60 (P=0,881), 70 (P=0,128) and 90 days (P=0,801) of life at portoenterostomy. Patients with Biliary Atresia presenting PCK7 higher than 10.18% showed a lower VEGF A than those patients with a lower PCK7 (P=0,044). The variable that differentiated subgroups regarding VEGF A expression among patients with biliary Atresia was not age, but the extent of biliary proliferation. A decreased VEGF A expression in liver occurs in pictures of obstruction for both bile and arterial blood flows obtained by mechanical obstruction of bile ducts associated with hepatic arterial ligation. Our data suggest that in biliary Atresia the biliary structures are affected by an ischemic process, which becomes evident in patients with a greater extent of biliary proliferation.