Atividade antimicrobiana de cimentos que contêm silicato de cálcio em dentina infectada por biofilme muiti-espécies : um estudo em microcospia confocal à laser

Abstract

Este estudo teve como objetivo avaliar, em microscopia confocal à laser (CLSM), a ação antimicrobiana do Neo MTA Plus, do Biodentine e do MTA Angelus, utilizando um modelo de biofilme multi-espécies microcosmo, e descrever a morfologia dos microrganismos encontrados no biofilme, através da análise em microscópio eletrônico de varredura (MEV). Cinquenta e seis blocos de dentina, confeccionados a partir de raízes de dentes humanos, foram cortados em dimensões de 5 x 4 x 4 mm, limpos e esterilizados. Dois blocos foram utilizados para o controle do processo de esterilização. Os demais 54 foram fixados em placas de Hawley confeccionadas para 6 voluntários. Cada voluntário utilizou uma placa por 72 horas. Após esse período, os blocos foram mantidos em poços de cultura celular, contendo BHI, em estufa à 37ºC, por um período de 21 dias. Ao final do processo de maturação do biofilme, as amostras foram divididas aleatoriamente em 5 grupos, conforme os cimentos a serem testados e o método de análise: Neo MTA Plus (n=12), Biodentine (n=12), MTA Angelus (n=12), controle negativo (n=12) e grupo para análise em MEV (n=6). A seguir, os cimentos foram colocados em contato com o biofilme dos blocos dos grupos-teste e os conjuntos (bloco + cimento) ou os blocos do grupo controle e para análise em MEV foram recolocados em poços de cultura contendo BHI, onde permaneceram por 7 dias à 37ºC. A análise em CLSM foi realizada nos blocos de dentina e nos cimentos, separadamente. A analise em MEV foi realizada nas seis amostras do grupo correspondente. Todos os grupos apresentaram mais de 50% de bactérias viáveis. O Neo MTA Plus foi o único material a apresentar diferença significativa quando comparado ao grupo controle negativo (P=.0379). A análise em MEV mostrou um biofilme composto por bactérias de forma circular e de bastonetes, circundadas por matriz extra-celular. Em conclusão, todos os grupos apresentaram bactérias viáveis e o Neo MTA Plus teve a maior ação antimicrobiana.

This study aimed to assess, by confocal laser scanning microscopy (CLSM), the antimicrobial effect of Neo MTA Plus, Biodentine and MTA Angelus, using a microcosmo biofilm model, and to describe the microrganisms morphology, by SEM. Fifty-six dentin blocks were made from human teeth roots, cut in a size 5 x 4 x 4 mm, cleaned and sterelized. Two blocks were used to sterelization control. The others 54 blocks were fixed in Hawley retainers made for 6 volunteers that used it for 72h. After this period, they were placed in wells with BHI for 21 days, at 37ºC. At the end of the biofilm growth, the samples were randomly divided in 5 groups: Neo MTA Plus (n=12), Biodentine (n=12), MTA Angelus (n=12), negative control (n=12), and SEM analysis (n=6). The cements were placed in contact with the blocks of the tested groups. All samples were replaced in wells with BHI by 7 days at 37ºC. CLSM analysis evaluated the dentin blocks and cements isolated. SEM observation were performed in the six samples of the respective group. All groups presented a level of viable bacteria higher than 50%. Neo MTA Plus was the only one that showed significant difference from the negative control group (P=.0379). SEM analysis showed a biofilm composed of spherical and rod-shaped bacteria surrounded by extracellular matrix. All groups presented viable bacteria and Neo MTA Plus had the highest antimicrobial effect.