Caracterização de cepas de Pseudomonas spp isoladas de efluente hospitalar não tratado : resistência a beta-lactâmicos e presença de integrons

Abstract

O gênero Pseudomonas, amplamente distribuído no ambiente, está frequentemente associado a características de resistência aos antimicrobianos beta-lactâmicos e presença de integrons. Os objetivos do presente trabalho foram verificar o perfil de susceptibilidade antimicrobiana dos isolados de Pseudomonas spp obtidos a partir do efluente hospitalar não tratado, bem como a presença de genes de resistência a beta-lactâmicos e integrons, nas diversas espécies encontradas. As amostras de efluente foram provenientes de quatro hospitais de Porto Alegre, RS. As colônias de bactérias não fermentadoras foram isoladas a partir de Agar Mac Conkey, e sua identificação foi confirmada utilizando PCR do 16S rRNA. A susceptibilidade dos isolados foi testada pela metodologia de difusão em ágar, sendo utilizados 11 antimicrobianos beta-lactâmicos. A pesquisa de genes blaIMP, blaVIM, blaSPM-1, blaOXA-23-like, blaOXA-24-like, blaOXA-51-like e blaGES-like e integrons foi realizada através de PCR. Foram obtidos 124 isolados, dentre eles 8 espécies diferentes, sendo que a mais freqüente foi P. pseudoalcaligenes. A taxa de resistência encontrada foi considerada alta, sendo que 62 (50%) dos isolados foram multiresistentes. Nenhum isolado foi positivo para os genes pesquisados. Foram encontrados 68 isolados positivos para integron, destes, 52 foram identificados como pertencentes à classe 1. Não pode ser estabelecida a presença de integrons de classe 2 e 3. Efluente hospitalar não tratado pode servir como fonte de contaminação ambiental, pois implica no descarte de bactérias resistentes aos antimicrobianos e, no presente trabalho, positivas para integrons. As bactérias contendo este elemento de mobilidade genética podem contribuir para a disseminação de determinantes de resistência, bem como servir de reservatório em potencial para estes genes.

Pseudomonas genus, widely distributed in the environment, is often found associated to determinants of beta-lactams resistance and presence of integrons. The present study was conducted to investigate the resistance profile of Pseudomonas spp strains isolated from untreated hospital effluents, likewise beta-lactamase genes and integrons. Untreated hospital effluents were collected from four hospitals in Porto Alegre, RS. Non-fermenter bacteria were isolated; the identification was confirmed by 16S rRNA PCR. Susceptibility testing was determined by the disk-diffusion method using 11 different betalactams antimicrobials. The beta-lactamase genes blaIMP, blaVIM, blaSPM-1, blaOXA-23-like, blaOXA-24-like, blaOXA-51-like and blaGES-like genes and the integrons genes intI1, intI2 and intI3 were determined by PCR using specific primers. One hundred and twenty-eight isolates were recovered; the most common species was P. pseudoalcaligenes. The resistance level found was considered high, 62 (50%) isolates were multi-resistants. No isolate carrying the beta-lactamase genes tested was found among the strains. Of 68 isolates considered positives for integrons, 52 were identified as carrying the class 1 integron gene, intI1. No isolate carrying class 1 or class 2 integrons was found among the strains. Untreated hospital effluents could be a source of environmental contamination due to discharge of antimicrobial resistant bacteria, in the case of the present study, also integron positives. Bacteria carrying this genetic mobile element can contribute for the dissemination of resistance determinants and also act like a potential reservoir for many types of resistance genes.