Avaliação de parâmetros neurotrófico e neuro inflamatórios em ratos com artrite na articulação temporomandibular tratados com melatonina e/ou morfina

Abstract

Os fármacos opioides são potentes analgésicos amplamente utilizados a nível ambulatorial e hospitalar no alívio da dor aguda e crônica. Esta classe de fármacos está relacionada a importantes efeitos adversos, incluindo letargia, dependência e aumento paradoxal da dor (hiperalgesia induzida por opioide, HIO). O tratamento atual da HIO realizado com fármacos anti-inflamatórios é insatisfatório, e pesquisas atuais buscam novas terapias no manejo da dor, como a melatonina. Nesse cenário, este trabalho teve como objetivo principal investigar o efeito da administração repetida de morfina e/ou melatonina em parâmetros neurotrófico e neuroinflamatórios em ratos condicionados a um modelo de artrite da articulação temporomandibular (AAT). Ao total 73 ratos Wistar (65 dias; n=8/9 por grupos) foram randomizados e divididos (D0) conforme injeção intra-articular na articulação temporomandibular (ATM): em grupos SHAM, com infiltração de salina 0,9%, e grupos DOR, com infiltração de Complexo Adjuvante de Freund (CFA) não diluído. Após quatorze dias (D14), iniciou-se o tratamento diário com melatonina (50 mg/kg, por via intraperitoneal) e/ou morfina (5 mg/kg, por via subcutânea), pelo período de 8 dias. Ao final do protocolo experimental (D23), realizou-se a eutanásia dos animais e quantificou-se a concentração de proteínas, o marcador neurotrófico (fator neurotrófico derivado do encéfalo, BDNF) e marcadores inflamatórios fator alfa de necrose tumoral (TNF-α) e interleucina-10 (IL-10) em amostras de córtex total, medula espinhal e tronco encefálico. Paralelamente, foram confeccionadas lâminas histológicas e fotografias representativas da ATM dos grupos. Os resultados do estudo demonstram a efetividade do modelo de AAT, visto que os grupos DOR apresentaram acúmulo de CFA e evidente inflamação tecidual. Associado a isto, o modelo de AAT aumentou significativamente os níveis de TNF-α e IL-10 em tronco encefálico. Paralelamente, foram confeccionadas lâminas histológicas e fotografias representativas da ATM dos grupos. Os resultados do estudo demonstram a efetividade do modelo de AAT, visto que os grupos DOR apresentaram acúmulo de CFA e evidente inflamação tecidual. Associado a isto, o modelo de AAT aumentou significativamente os níveis de TNF-α e IL-10 em tronco encefálico. Por outro lado, o tratamento com melatonina induziu uma diminuição significativa nos níveis de BDNF na mesma estrutura. Por fim, o grupo DOR tratado isoladamente com a melatonina apresentou redução na inflamação tecidual na ATM e este efeito não foi observado quando a melatonina foi associada à morfina. Estes resultados evidenciam a aplicação do CFA como modelo indutor confiável de AAT e apontam o potencial da melatonina como um possível adjuvante no tratamento de processos inflamatórios orofaciais.

Opioids are potent analgesics widely used at hospitals or clinical centers to treat acute and chronic pain. This pharmaceutical group is related to critical adverse effects, such as lethargy, dependency and paradoxical pain (opioid-induced hyperalgesia, OIH). The current OIH and pain treatment using anti-inflammatory drugs is unsatisfactory and researchers aim for more efficient pain management therapies, such as melatonin. In this scenario, this study had the main goal to investigate the effect of repeated melatonin/morphine injections treatment on neurotrophic and neuroinflammatory markers on rats conditioned to a temporomandibular articulation (TMA) arthritis model (TAA). In total, 73 Wistar rats (65 days old; n=8/9 each group) were randomly divided (D0) according to temporomandibular injections: SHAM groups, 0,9% saline infiltration and PAIN groups, injected with undiluted Adjuvant Complete Freund (CFA). After 14 days (D14), rats were treated daily with melatonin (50 mg/kg, intraperitoneally) and/or morphine (5 mg/kg, subcutaneous) during an 8 days period. At the end of protocol experimentation (D23), euthanasia was conducted and followed by quantification of proteins, neurotrophic BDNF marker, TNF-ɑ and IL-10 inflammation markers in the cortex, spinal cord and encephalic steam. In parallel, ATM was dissected, stained and analyzed using histological microscopy/photography. Our results demonstrate the efficiency of the used TAA model, given the CFA accumulation and tissue inflammation found in the PAIN groups. Associated to this finding, AAT model significantly increased TNF-ɑ and IL-10 levels on the encephalic steam. On the other hand, melatonin treatment significantly diminished BDNF maker on the same brain structure. Finally, the DOR group treated with melatonin alone showed a reduction in tissue inflammation in the TMJ and this effect was not observed when melatonin was associated with morphine.. These results enlight the CFA injection as a reliable TAA induction model and point to the potential use of melatonin as an adjuvant treatment to orofacial inflammatory conditions.