Development and application of lc-uv method for the quantification of the anti-inflammatory thiazolidinone pg15 in rat plasma

Abstract

Um método rápido e simples de cromatografia líquida com detecção por ultravioleta foi desenvolvido e validado para quantificação, em plasma de rato, do composto (5Z,E)-3-[2-(4-clorofenil)-2-oxoetil]-5-(1H-indol-3-ilmetileno)-tiazolidina-2,4-diona (PG15). Uma coluna em fase reversa C18 foi utilizada para separação do analito, seguida por detecção em UV a 385 nm. O método utilizou a precipitação do PG15 a partir do plasma e eluição isocrática com metanol:água (90:10, v/v). O tempo total da corrida foi 7,5 min. O método proposto foi validado e mostrou-se linear entre 62,5 e 4000 ng mL-1. A precisão intra- e inter-dia, expressa como desvio padrão relativo, foi menor que 15 e 10%, respectivamente, para todas as concentrações investigadas. A exatidão, medida através dos controles da qualidade, ficou entre 86,1-114,9 %. A aplicabilidade do método validado foi testada no estudo farmacocinético pré-clínico do PG15.

A simple and rapid liquid chromatography–ultraviolet detection (LC–UV) method has been developed and validated for quantifying (5Z,E)-3-[2-(4-chlorophenyl)-2-oxoethyl]-5-(1H-indol-3-ylmethylene)-thiazolidine-2,4-dione (PG15) in rat plasma. A C18 reversed phase column provided chromatographic separation of the analyte which was followed by UV detection at 385 nm. The method involves precipitation of PG15 from plasma and isocratic elution with methanol:water (90:10, v/v). Total elution time was 7.5 min. The proposed method was validated and showed linear correlation in the range of 62.5 to 4000 ng mL-1. The within- and between-day precision, expressed as the relative standard error, were found to be less than 15 and 10 %, respectively, for all the concentrations investigated. The accuracy, measured using the quality control samples, was in the range of 86.1-114.9 %. The applicability of the validated method was tested in a pre-clinical pharmacokinetic study of the thiazolidinone PG15.