Avaliação da resposta imune celular após a vacina de Salmonella gallinarum em aves intoxicadas com aflatoxinas

Abstract

O objetivo da pesquisa foi avaliar o comportamento das células do sistema imune após a aplicação da vacina SG9R (Salmonella Gallinarum), correlacionando a intoxicação de aflatoxinas (AFLA) em poedeiras comerciais com e sem adsorvente (AAM) na dieta. Foram utilizadas poedeiras comerciais de linhagem Brown com um dia de idade. A vacina foi utilizada de forma subcutânea na região dorsal do pescoço, aplicando 0,2 ml por ave. As coletas de sangue foram realizadas 3, 14 e 21 dias após a vacinação. Durante o experimento foram utilizadas duas doses de Aflatoxinas (1 e 2,5 ppm) e duas concentrações de adsorvente (1 e 2,5 kg/ton), de acordo com os seguintes tratamentos: T1 (controle); T2: 9R + 2,5 ppm AFLA + 2,5 kg/ton AAM; T3: 9R; T4: 9R +2,5 ppm AFLA; T5: 2,5 ppm AFLA; T6: 2,5 ppm AFLA + 2,5kg/ ton AAM; T7: 9R + 1 ppm AFLA; T8: 9R + 1 ppm AFLA + 1 kg/ton AAM. As aves começaram a consumir AFLA/AAM desde o primeiro dia. As células avaliadas foram: linfócitos T citotóxicos de mucosa (CD4-TCRvβ1+), linfócitos T citotóxicos ativados (CD8+ CD28-), linfócitos T auxiliares de mucosa (CD4+TCRvβ1+), linfócitos B (Bu-1a +), monócitos (Kul+MHCII+), monócitos fagocíticos (%) e heterófilos fagocíticos (%). Os marcadores celulares foram interpretados por citometria de fluxo. A vacina SG9R reduziu de forma significativa (p˂0,05) a concentração de linfócitos T citotóxicos ativados (CD8+CD28-), tornando esse marcador um bom parâmetro para ser analisado antes e após a imunização com SG9R. Os monócitos (Kul+MHCII+), apresentaram aumento estatisticamente significante (p˂0,05) de concentração após a vacinação. As aflatoxinas demonstraram um efeito supressivo sobre os linfócitos T auxiliares de mucosa (CD4+TCRVβ1+), linfócitos T auxiliares periféricos (CD4+TCRVβ1-) e linfócitos T citotóxicos de mucosa (CD4-TCRVβ1+) em aves vacinadas, apresentando diferença significativa (p˂0,05) nas coletas com 3 e 14 dias após a vacinação. A inclusão de 2,5 kg/ton de adsorvente na ração na presença da vacina, neutralizou os efeitos da aflatoxicose relatados acima, especialmente nas concentrações de linfócitos T auxiliares de mucosa (CD4+TCRVβ1+), linfócitos T auxiliares periféricos (CD4+TCRVβ1-) e linfócitos T citotóxicos de mucosa (CD4-TCRVβ1+). As concentrações dessas células aumentaram significativamente (p˂0,05) 21 dias após a vacinação. Portanto, a concentração de células do sistema imune pode apresentar diferenças após a vacina SG9R. Os efeitos supressivos das aflatoxinas junto a população de linfócitos T ficaram evidentes após a vacinação. No entanto, esses efeitos foram neutralizados quando utilizado 2,5 kg/ton de adsorvente na ração.

The objective of this research was to evaluate the behavior of some specific immune cells after applying SG9R (Salmonella Gallinarum) live vaccine. The effect of adding Aflatoxin (AFLA) and an anti-mycotoxin absorbent to the rations was also evaluated. One-day-old commercial layers were used in this experiment. Each bird was vaccinated subcutaneously in the neck with 0.2 ml of the vaccine.Blood samples were collected at 3, 14 and 21 days post vaccination. The concentrations of the Aflatoxins mixed in the feed in the trial were 1 and 2.5 ppm (1 and 2.5 kg/ton). The concentrations of the anti-mycotoxins absorbent used were 1-2.5 kg / ton. The following treatments were used: T1: control; T2: 9R + 2.5 ppm AFLA + 2.5 kg/ton AAM; T3: 9R; T4: 9R +2.5 ppm AFLA; T5: 2.5 ppm AFLA; T6: 2.5 ppm AFLA + 2.5 kg/ton AAM; T7: 9R + 1 ppm AFLA; T8: 9R + 1 ppm AFLA + 1 kg/ton AAM. Birds started consuming Aflatoxin and the anti-mycotoxin absorbent at one day of age. The following cells were evaluated: peripheral helper T lymphocytes (CD4+TCRvβ1-), helper T lymphocytes of mucosa (CD4+TCRvβ1+), cytotoxic T lymphocytes of mucosa (CD4-TCRvβ1+), Activated cytotoxic T lymphocytes (CD8+CD28-), B lymphocytes (Bu-1a+), monocytes (Kul+MHCII+), phagocytic monocytes (%) and phagocytic heterophils (%). Cells markers were measured by flow cytometry. SG9R vaccination significantly decreased (p˂0.05) the concentration of activated cytotoxic T lymphocytes (CD8+CD28-). Making this marker a good parameter to be analyzed before and after immunization with SG9R. The monocytes (Kul+MHCII+) presented a statistically significant increase (p˂0.05) in concentration after vaccination. In the treatments where aflatoxins were present we detected a large suppressive effect on the mucosal helper T lymphocytes (CD4+TCRVβ1+), peripheral helper T lymphocytes (CD4+TCRVβ1-) and cytotoxic T lymphocytes of mucosa (CD4-TCRVβ1+) in vaccinated birds. With significant difference (p˂0.05) in the collections with 3 and 14 days after vaccination. The inclusion of 2.5 kg of the adsorbent in the diet per tonne of feed neutralized the effects of aflatoxicoses reported above, especially in the concentrations of helper T lymphocytes of mucosa (CD4+TCRVβ1+), peripheral (CD4+TCRVβ1-) and cytotoxic of mucosa (CD4-TCRVβ1+). Increasing the concentration of these cells in the significant difference (p˂0.05) 21 days after vaccination. Therefore, the concentration of immune system cells may show differences after the SG9R vaccine. The suppressive effects of aflatoxins on the T lymphocyte population were evident after vaccination. However, these effects were neutralized with 2.5 kg / ton of adsorbent.