Produção in vitro e expressão gênica de IGF-I e IGF-II em embriões de fêmeas Nelore submetidas a administrações de somatotropina recombinante bovina

Abstract

Com o presente trabalho, objetivou-se estudar a influência da somatotropina recombinante bovina (rbST) sobre a quantidade e qualidade de oócitos aspirados in vivo, produção embrionária e expressão gênica dos fatores de crescimento semelhantes à insulina (IGFs) tipos I e II em embriões produzidos in vitro de fêmeas bovinas da raça Nelore. Cinco vacas foram tratadas com duas administrações de 2mL de solução salina como placebo, com intervalo de catorze dias entre elas, sendo a primeira administração realizada dezenove e a segunda cinco dias antes das aspirações foliculares; decorridos trintas dias destas aspirações, em sistema crossover, o mesmo protocolo foi utilizado nesses cinco animais sendo, neste caso, a solução salina substituída por 500mg de rbST, com o intuito de efetuar-se comparações entre os tratamentos. A partir dos oócitos recuperados, realizou-se a produção in vitro de embriões (PIVE), sendo todas as etapas que envolvem este processo analisadas e com posterior realização de reações em cadeia da polimerase em tempo real (qPCRs) para expressões gênicas de IGF-I e IGF-II nos blastocistos produzidos. Observou-se que a rbST, ainda que numericamente tenha influenciado positivamente sobre os parâmetros estudados, não exerceu influência significativa sobre a quantidade e qualidade de oócitos aspirados in vivo, produção embrionária e expressão gênica de IGF-I e IGF-II em embriões produzidos in vitro de fêmeas bovinas da raça Nelore.

The present work aimed of studying the influence of recombinant bovine somatotropin (rbST) on quantity and quality of in vivo aspirated oocytes, embryo production and gene expression of insulin-like growth factors (IGFs) types I and II in in vitro produced embryos from bovine females of Nelore breed. Five cows were treated with two administrations of 2mL of saline solution as placebo, with an interval of 14 days between them, being the first administration held 19 and the second 5 days before follicular aspirations; within 30 days after these aspirations, in a crossover design, the same protocol was used in these five animals being, in this case, the saline solution replaced by 500mg of rbST in order to perform comparisons between treatments. From retrieved oocytes, in vitro production (IVP) was performed, being all stages involving this process evaluated with subsequent achievement of polymerase chain reactions in real time (qPCRs) for gene expression of IGF-I and IGF-II in produced blastocysts. It was observed that the rbST, although having a numerical increase, did not show significant influence, on the parameters studied, on the quantity and quality of in vivo aspirated oocytes, embryo production and gene expression of IGF-I and IGF-II in in vitro produced embryos from bovine females of Nelore breed.

Este estudio tuvo como objetivo estudiar la influencia de la somatotropina recombinante bovina (rbST) en la cantidad y calidad de los ovocitos aspirados in vivo, la producción embrionaria y la expresión génica de los factores de crecimiento insulínicos (IGFs) tipos I y II en embriones producidos in vitro a partir de Nelore hembras bovinas. Se trataron cinco vacas con dos administraciones de 2mL de solución salina como placebo, con un intervalo de catorce días entre ellas, siendo la primera administración diecinueve y la segunda cinco días antes de las aspiraciones foliculares; a los treinta días de estas aspiraciones, en un sistema cruzado, se utilizó el mismo protocolo en estos cinco animales, en cuyo caso se sustituyó la solución salina por 500mg de rbST, con el fin de realizar comparaciones entre tratamientos. A partir de los ovocitos recuperados se llevó a cabo la producción de embriones in vitro (PIVE), analizándose todas las etapas de este proceso y con la posterior realización de reacciones en cadena de la polimerasa en tiempo real (qPCRs) para IGF-I e IGF-II en los blastocistos producidos. Se observó que la rbST, aunque numéricamente influyó positivamente en los parámetros estudiados, no tuvo una influencia significativa en la cantidad y calidad de ovocitos aspirados in vivo, producción embrionaria y expresión génica de IGF-I e IGF-II en embriones producidos in vitro de hembras bovinas Nelore.