Avaliação de variantes polimórficas em genes envolvidos em apoptose e seus papéis na suscetibilidade e progressão clínica da doença falciforme

Abstract

Base teórica: A anemia falciforme (AF) é uma doença monogênica e hereditária, caracterizada pelas crises dolorosas e inflamação crônica. O estado inflamatório da AF resulta em uma elevação crônica de leucócitos (neutrófilos), macrófagos (monócitos), devido ao aumento das hemacias falciformes com a apresentação da fosfatidilserina na circulação sanguinea. A apoptose ou morte celular programada é um mecanismo celular conhecido por manter o equilibrio homeostático durante a inflamação. Algum defeito nesse mecanismo, pode contribuir para o progresso clínico da doença inflamatória, como AF. Objetivo: Desta forma, o presente estudo tem como principal objetivo, investigar o perfil genético de pacientes com AF através da análise da presença e frequência de variantes polimórficas em genes associados a apoptose, comparando estes dados com indivíduos controles. Métodos: Foram extraídas 138 Amostras de DNA a partir de sangue periférico de pacientes com AF. As amostras foram amplificadas e genotipadas para os SNPs associados a apoptose (FAS-1337G / A, FAS-670A / G, BCL-2 -938C / A, BAX-248G / A) usando PCR e enzima de restrições especificas. Calculamos as frequências alélicas e genotipicas para cada SNP e comparamos com o grupo controle. Resultados: Diferenças estatisticamente significativas (p> 0,001) foram observadas entre as frequências genotípica e alélica dos outros três polimorfismos (FAS -670G / A, BCL-2 -938C / A e BAX-248G / A) em comparação com o grupo de controle. Por outro lado, não foram observadas diferenças estatisticamente significativas (p> 0,05) entre as frequências genotípicas e alélicas em relação ao polimorfismo FAS -1377 G / A. Conclusão: Nosso estudo mostrou, que existem associações entre as variantes FAS-670G, BCL2 -938C e BAX -248A e a AF, e que a expressão destesgenes potencialmente pode ser correlacionada a fatores modificadores da doença.

Backgroun: Sickle cell anemia (SCA) is a monogenic and hereditary disease characterized by painful crises and chronic inflammation. The inflammatory state of SCA results in a chronic elevation of leukocytes (neutrophils), macrophages (monocytes), associated to an increase in sickle red cells with the presentation of phosphatidylserine in the bloodstream. Apoptosis or programmed cell death is a cellular mechanism known to maintain homeostatic balance during inflammation. Any defect in this mechanism may contribute to the clinical progress of inflammatory disease, such as SCA. Objective: This study has as main objective to investigate the genetic profile of patients with SCA through the analysis of the presence and frequency of polymorphic variants in genes associated with apoptosis, comparing these data with control individuals Methods: DNA samples were extracted from peripheral blood of 138 patients with SCA. The samples were amplified and genotyped for SNPs in apoptosis related genes (FAS-1337G/ A, FAS-670A / G, BCL 2 -938C/A, BAX-248G / A) using PCR and specific restriction enzymes. We calculated the allelic and genotypic frequencies for each SNP and compared with the control group. Results: Statistically significant differences (p>0.001) were observed between the genotypic and allelic frequencies of the other three polymorphisms (FAS -670G / A, BCL-2 -938C / A e BAX-248G / A) compared with control group. On the other hand, no statistically significant differences (p>0.05) between genotypic and allelic frequencies concerning the FAS -1377 G/A polymorphism were observed. Conclusion: Our study showed for the first time some associations between the FAS-670G, BCL-2 -938C and BAX -248A variants and SCA, suggesting that the expression of such genes can constitute disease modifying factors.