Efeito da suplementação com probióticos em pacientes com esteato-hepatite não alcoólica : ensaio clínico randomizado

Abstract

Introdução: A Doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) compreende desde a esteatose hepática simples até esteato-hepatite não alcoólica (EHNA), que pode progredir para cirrose ou hepatocarcinoma. Atinge um quarto da população mundial e está associada com a epidemia da obesidade. Considerando o aumento da prevelância de EHNA e a existência de lacunas no seu tratamento, esse estudo objetivou avaliar o efeito da suplementação com probióticos em marcadores de função hepática e parâmetros clínicos em pacientes com EHNA. Métodos: Trata-se de um ensaio clínico randomizado duplo-cego que incluiu pacientes adutos com EHNA diagnosticados por biópsia hepática. A intervenção consistiu de 24 semanas de suplementação com um mix de probióticos (Lactobacillus acidophillus + Bifidobacterium lactis + Lactobacillus rhamnosus + Lactobacillus paracasei, 1x109 CFU) ou placebo, duas vezes ao dia. No período basal e após as 24 semanas de tratamento, foram avaliados os seguintes parâmetros: dados clínicos e demográficos, elastografia transitória (FibroScan), enzimas hepáticas, NAFLD Fibrosis Score, Fatty Liver Index, avaliação laboratorial, concentração sérica de Toll-Like receptor -4 (TLR-4) e biomarcador Citokeratin 18 (CK-18). Foi também realizada avaliação antropométrica, atividade física e do consumo alimentar, além de análises da microbiota intestinal através da região hipervariável V4 do gene 16S rRNA. Resultados: Foram 85 pacientes elegíveis, desses, 46 pacientes confirmaram o diagnóstico de EHNA por biópsia hepática e, Quarenta e quatro pacientes completaram o estudo, sendo 59% mulheres, com média de idade de 51,4 ±11,6 anos. No período basal, 87% dos pacientes tinham baixo grau de fibrose (26% F0; 61% F1 através de biopsia), valores de enzimas hepáticas [AST 32 (24-46) U/L, ALT 42 (28-63) U/L, GGT 46 (28-84) U/L], circunferência de cintura aumentada (104,7±12 cm) e IMC com classificação de obesidade 30,97 (28,36-33,75) kg/m2, 76% em Síndrome Metabólica (SM). Após 24 semanas de intervenção, não foram observadas diferenças entre os grupos probiotico e placebo nos componentes da SM, circunferência da cintura, IMC, escores e enzimas hepáticas. (p> 0.05 para todos). CK-18 reduziu em ambos os grupos após a intervenção: no grupo probiótico de 981.09 (738.34-1134.73) para 639.46 (509.50-817.23) mIU / ml (p ≤0.01) e no grupo placebo de 789.74 (540.80-985.65) para 605.45 (472.13-837.22) mIU / ml (p = 0.013), entretanto sem diferença significativa entre os grupos (p = 0.109). Da mesma forma, TLR-4 reduziu em ambos os grupos após a intervenção, mas sem diferença entre os grupos (p = 0.885). Em relação à microbiota intestinal, não foram observadas diferenças na diversidade e abundância de filos e gêneros no grupo probiótico. Nenhuma outra mudança clinicamente significativa foi 10 observada nos grupos. Conclusão: A intervenção com probióticos por 24 semanas em pacientes com EHNA com baixo grau de fibrose demonstrou ser incapaz de promover alterações significativas na redução de biomarcadores de lesão e inflamação hepática, nas variáveis clínicas e nutricionais, e também na diversidade da microbiota intestinal.

Introduction: Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) embraces from simple hepatic steatosis to nonalcoholic steatohepatitis (NASH), which can progress to cirrhosis or hepatocarcinoma. It affects a quarter of the world population and is associated with the obesity epidemic. Considering the increasing prevalence of NASH, and the existing gaps in its treatment, this study aimed to evaluate the effect of probiotic supplementation on liver function markers, and clinical parameters, in NASH patients. Methods: This double-blind, randomized clinical trial included adult outpatients with biopsy-proven NASH. The intervention consisted of 24 weeks of supplementation with probiotic mix (Lactobacillus acidophillus + Bifidobacterium lactis + Lactobacillus rhamnosus + Lactobacillus paracasei, 1x109 CFU for each) or placebo, twice a day. At baseline and 24-weeks after treatment, the following parameters were evaluated: demographic and clinical data, transient elastography (FibroScan), hepatic enzymes, NAFLD fibrosis score, Fatty Liver Index, laboratory assessment, serum concentration of toll-like receptor-4 (TLR-4) and cytokeratin 18 (CK-18) biomarker. An anthropometric data assessment, dietary intake and physical activity were also carried out, as well as an analysis of the intestinal microbiota through the hypervariable V4 region of the 16S rRNA gene. Results: From the 85 patients eligible, 46 were diagnosed with NASH through hepatic biopsy, and forty-four patients completed the trial (51,4 ±11,6 years, 59% women). At baseline, 87% had low hepatic fibrosis degree (26% F0; 61% F1 at biopsy), values of hepatic enzymes close to normal [AST 32 (24-46) U/L, ALT 42 (28-63) U/L, GGT 46 (28-84) U/L], increased waist circumference (104,7±12 cm), and BMI with obesity classification 30,97 (28,36-33,75) kg/m2, and 76% with Metabolic Syndrome (MetS). After 24 weeks of intervention, no differences were observed between the Probiotic and Placebo groups in the components of the MetS, waist circumference, BMI, scores or liver enzymes (p> 0.05 for all). CK-18 was reduced in both groups after the intervention: in the probiotic group from 981.09 (738.34-1134.73) to 639.46 (509.50-817.23) mIU / ml (p ≤ <0.01) and in the placebo group from 789.74 (540.80-985.65) to 605.45 (472.13-837.22) mIU / ml; p = 0.013, however with no significant difference between groups (p = 0.109). Likewise, TLR-4 was reduced in both groups after the intervention, also with no difference between groups (p = 0.885). In terms of gut microbiota (GM) no differences were observed in the diversity or abundance of philum and genus in probiotic group. No other clinically significant changes were observed in the groups. Conclusion: The intervention with probiotics for 24 weeks in 12 patients with EHNA with low degree of fibrosis demonstrated to be unable to promote significant changes in the reduction of liver injury and inflammation biomarkers, nutritional and clinical parameters, and also in the diversity GM.